Разное

Белые пленки в кале: Ваш браузер устарел

«Городская больница №2 г. Владимира» Статьи |

Хроническая недостаточность сердца (ХНС) — это заболевание, при котором сердце не способно выполнять свои функции, а именно — обеспечивать все органы и ткани организма необходимым количеством крови. Это заболевание стало одной из главных проблем нашего времени и чаще встречается у женщин, чем у мужчин. Факторы риска, какой бывает? В медицине известен факт, что хроническая сердечная … Читать далее

Рубрики Здоровье

Определение заболевания Гастральный рефлюкс — это патологическое нарушение ЖКТ, характеризующееся спонтанным и повторяющимся обратным током желчи (регургитацией) из двенадцатиперстной кишки в желудок. Этиология — основные причины возникновения Выделяют несколько факторов, при воздействии которых может развиваться ДГР. врожденные и приобретенные патологии пищевода деструктивного генеза; грыжи диафрагмы; нарушения мышечного тонуса непосредственного нижнего пищеводного сфинктера; несостоятельность соединительных тканей. … Читать далее

Рубрики Лечение

Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) – болезнь, для которой характерна неспособность сердца к перекачиванию определенного объема крови, достаточного для обеспечения организма кислородом. ХСН может быть вызвана многими заболеваниями сердечно-сосудистой системы, к наиболее распространенным из которых относят ишемическую болезнь сердца, гипертонию, эндокардит и ревматоидные пороки сердца. Ослабление сердечной мышцы приводит к невозможности нормального перекачивания крови, в результате … Читать далее

Рубрики Здоровье

Народ называет надколенник «коленной чашечкой». Это выпуклая кость, которая хорошо видна при движении колена. Надколенник – это крупная сесамовидная кость, которая находится в толще сухожилий в медицине. Сесамовидные кости увеличивают тягу мышцы, действуя как блок. Сухожилие, где расположен надколенник, создается путем соединения передних мышц бедра или четырехглавой мышцы. При разгибании надколенник поднимается выше суставной щели, … Читать далее

Рубрики Здоровье

Типы насморка у новорожденных У детей насморк может возникать по разным причинам, и лечение зависит от их выявления врачом-педиатром. В большинстве случаев для борьбы с насморком используются разнообразные лекарственные средства для носа. Если причина насморка физиологическая, то для его лечения рекомендуется производить промывание носа и удалять слизь с помощью назального аспиратора. Когда у ребенка возникает … Читать далее

Рубрики Лечение

Плечевой сустав — одно из самых подвижных сочленений в опорно-двигательном аппарате. Он вращается в разных направлениях, поэтому человек легко поворачивает, поднимает, а затем опускает руку. Высокая подвижность — частая причина утраты стабильности плеча в результате травмы или врожденных патологий. Если больной не обращается за медицинской помощью, то ситуации, когда плечевой сустав выскакивает, будут возникать все … Читать далее

Рубрики Здоровье

Что такое молочница (вульвовагинальный кандидоз)? У женщин возникает вульвовагинальный кандидоз, вызываемый грибами Candida. Это инфекционное заболевание, которое часто сопровождается белыми выделениями из влагалища и известно как «молочница». Молочница была упомянута в научных работах еще во времена Гиппократа. Некоторые ученые и эксперты считают, что кандидоз является проявлением болезни всего организма и может проходить нетипично, требуя длительного … Читать далее

Рубрики Здоровье

Заболевание «миалгия», а точнее сказать миалгический синдром, дословно переводится с греческого как: myo-мышца, algos- боль, т.е. боль в мышцах. Миалгия — одна из наиболее частых причин обращения к врачу. В ряде случаев миалгия способствует значительному снижению качества жизни, работоспособности, подавленному состоянию, что приводит к развитию стресса и способствует поддержанию депрессивного состояния. Следует сказать, что длительный … Читать далее

Рубрики Здоровье

Симптомокомплекс зудящие ощущения в носовых проходах, глазах, на кожных покровах; гиперемию конъюнктивы; слезотечение; першение в носоглотке; снижение обоняния за счет отечности слизистой; заложенность носа; ослабление вкусовых ощущений; отечность губ, лица; кожные высыпания; кашель. Аллергия проявляется обильной ринореей, характеризующейся выделениями из носа в большом количестве, которые прозрачные и водянистые. Не зависимо от выраженности клинических признаков, необходимо … Читать далее

Рубрики Лечение

Офтальмологическое заболевание, которое часто встречается, называется ячменем на глазу. Это воспаление сальной железы или волосяного мешочка рядом с корнем ресницы. Ячмень проявляется красным пятном и гнойным бугорком, сопровождается зудом, ощущением постороннего тела в глазу и болью. Неприятность не улучшает внешний вид. Как избавиться от ячменя — актуальный вопрос. Что это такое? Офтальмологическое заболевание, которое часто … Читать далее

Рубрики Медицина

«Городская больница №2 г. Владимира» Статьи |

Хроническая недостаточность сердца (ХНС) — это заболевание, при котором сердце не способно выполнять свои функции, а именно — обеспечивать все органы и ткани организма необходимым количеством крови. Это заболевание стало одной из главных проблем нашего времени и чаще встречается у женщин, чем у мужчин. Факторы риска, какой бывает? В медицине известен факт, что хроническая сердечная … Читать далее

Рубрики Здоровье

Определение заболевания Гастральный рефлюкс — это патологическое нарушение ЖКТ, характеризующееся спонтанным и повторяющимся обратным током желчи (регургитацией) из двенадцатиперстной кишки в желудок. Этиология — основные причины возникновения Выделяют несколько факторов, при воздействии которых может развиваться ДГР. врожденные и приобретенные патологии пищевода деструктивного генеза; грыжи диафрагмы; нарушения мышечного тонуса непосредственного нижнего пищеводного сфинктера; несостоятельность соединительных тканей. … Читать далее

Рубрики Лечение

Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) – болезнь, для которой характерна неспособность сердца к перекачиванию определенного объема крови, достаточного для обеспечения организма кислородом. ХСН может быть вызвана многими заболеваниями сердечно-сосудистой системы, к наиболее распространенным из которых относят ишемическую болезнь сердца, гипертонию, эндокардит и ревматоидные пороки сердца. Ослабление сердечной мышцы приводит к невозможности нормального перекачивания крови, в результате … Читать далее

Рубрики Здоровье

Народ называет надколенник «коленной чашечкой». Это выпуклая кость, которая хорошо видна при движении колена. Надколенник – это крупная сесамовидная кость, которая находится в толще сухожилий в медицине. Сесамовидные кости увеличивают тягу мышцы, действуя как блок. Сухожилие, где расположен надколенник, создается путем соединения передних мышц бедра или четырехглавой мышцы. При разгибании надколенник поднимается выше суставной щели, … Читать далее

Рубрики Здоровье

Типы насморка у новорожденных У детей насморк может возникать по разным причинам, и лечение зависит от их выявления врачом-педиатром. В большинстве случаев для борьбы с насморком используются разнообразные лекарственные средства для носа. Если причина насморка физиологическая, то для его лечения рекомендуется производить промывание носа и удалять слизь с помощью назального аспиратора. Когда у ребенка возникает … Читать далее

Рубрики Лечение

Плечевой сустав — одно из самых подвижных сочленений в опорно-двигательном аппарате. Он вращается в разных направлениях, поэтому человек легко поворачивает, поднимает, а затем опускает руку. Высокая подвижность — частая причина утраты стабильности плеча в результате травмы или врожденных патологий. Если больной не обращается за медицинской помощью, то ситуации, когда плечевой сустав выскакивает, будут возникать все … Читать далее

Рубрики Здоровье

Что такое молочница (вульвовагинальный кандидоз)? У женщин возникает вульвовагинальный кандидоз, вызываемый грибами Candida. Это инфекционное заболевание, которое часто сопровождается белыми выделениями из влагалища и известно как «молочница». Молочница была упомянута в научных работах еще во времена Гиппократа. Некоторые ученые и эксперты считают, что кандидоз является проявлением болезни всего организма и может проходить нетипично, требуя длительного … Читать далее

Рубрики Здоровье

Заболевание «миалгия», а точнее сказать миалгический синдром, дословно переводится с греческого как: myo-мышца, algos- боль, т. е. боль в мышцах. Миалгия — одна из наиболее частых причин обращения к врачу. В ряде случаев миалгия способствует значительному снижению качества жизни, работоспособности, подавленному состоянию, что приводит к развитию стресса и способствует поддержанию депрессивного состояния. Следует сказать, что длительный … Читать далее

Рубрики Здоровье

Симптомокомплекс зудящие ощущения в носовых проходах, глазах, на кожных покровах; гиперемию конъюнктивы; слезотечение; першение в носоглотке; снижение обоняния за счет отечности слизистой; заложенность носа; ослабление вкусовых ощущений; отечность губ, лица; кожные высыпания; кашель. Аллергия проявляется обильной ринореей, характеризующейся выделениями из носа в большом количестве, которые прозрачные и водянистые. Не зависимо от выраженности клинических признаков, необходимо … Читать далее

Рубрики Лечение

Офтальмологическое заболевание, которое часто встречается, называется ячменем на глазу. Это воспаление сальной железы или волосяного мешочка рядом с корнем ресницы. Ячмень проявляется красным пятном и гнойным бугорком, сопровождается зудом, ощущением постороннего тела в глазу и болью. Неприятность не улучшает внешний вид. Как избавиться от ячменя — актуальный вопрос. Что это такое? Офтальмологическое заболевание, которое часто … Читать далее

Рубрики Медицина

Доброкачественная слизь или рак? » Страшные симптомы

Раковая клетка

Каким бы противным или пугающим ни казался этот белый налет или липкая масса, смешанная с вашим стулом, вы можете быть уверены, что это не признак рака.

«Белая пленка, которая образуется на поверхности стула, обычно вызывается стеатореей (жир в стуле или на нем)», — говорит Франьо Владик, доктор медицинских наук, сертифицированный гастроэнтеролог Центра здоровья пищеварительной системы и Центра эндоскопии в Огайо.

«Другие симптомы стеатореи могут включать боль или спазмы в животе, стул, плавающий поверх туалетной воды (подумайте, как уксус плавает на воде) или дурно пахнущий стул».

Белую пленку иногда называют слизью. «Слизь — это желеобразное вещество, — говорит доктор Владич.

«Присутствие слизи в кале — обычное явление. Слизь обычно прозрачная, но может быть и белого или желтого цвета.

«Специфических симптомов, связанных со слизью в стуле, нет.

«Он может быть получен из слизистой оболочки кишечника, что является нормальным физиологическим процессом, способствующим прохождению фекалий через толстую кишку для опорожнения, и нет диагноза, связанного со слизью в стуле».

Слава богу! Теперь вам больше не нужно бояться этих белых пленчатых комочков или комочков со стулом.

Их присутствие может быть частым или периодическим. Теперь вы можете просто игнорировать их.

Но если белый налет в стуле заставил вас задуматься о раке толстой кишки. .. еще раз, будьте уверены, это не симптом рака толстой кишки (или любого другого рака).

Cologuard

И, кстати, вы можете пройти домашний скрининг рака толстой кишки с помощью Cologuard, простого в использовании теста, который ваш врач может назначить вам, если вы еще не готовы пройти колоноскопию.

Набор Cologuard позволяет вам взять образец кала и отправить его по почте, чтобы его можно было проанализировать с помощью самой передовой технологии ДНК.

Эта технология идентифицирует, если они присутствуют, подозрительные клетки в образце.

Если ваш врач не слышал о Cologuard, вот номер Cologuard: 1-844-870-8870.

Особые интересы доктора Владича включают кислотный рефлюкс, колит, рак толстой кишки, ГЭРБ, изжогу, СРК, заболевания печени, ожирение, панкреатит и язвенную болезнь, среди многих других.
Лорра Гаррик много лет освещает темы медицины, фитнеса и кибербезопасности, написав тысячи статей для печатных журналов и веб-сайтов, в том числе в качестве гострайтера. Она также является бывшим персональным тренером, сертифицированным ACE.
.
Верхнее изображение: Shutterstock/Kateryna KonБелая пленка на стуле

Причины синего стула у маленьких детей и взрослых: уверенность!

Свекольно-красный стул и фекалии, окрашенные менструальной кровью

Может ли темно-зеленый стул быть вызван СРК?

Возможно, ваши «черные» какашки на самом деле темно-темно-зеленые

«Смолисто-черный» стул по определению гастроэнтеролога

Может ли стресс изменить цвет ваших какашек?

Может ли консервированная свекла вызывать красноту стула?

Причина золотисто-желтого стула

Когда цвет стула может означать рак

Может ли свекла сделать стул почти черным?

 

CDC – DPDx – Диагностические процедуры

Модифицированная процедура кислотоустойчивого окрашивания
ospora ), который может быть трудно обнаружить обычными красителями, такими как трихром. В отличие от модифицированного кислотостойкого красителя Циля-Нильсена, этот краситель не требует нагревания реагентов для окрашивания.

Образец:

Можно использовать концентрированный осадок свежего или законсервированного формалином стула. Другие типы клинических образцов, такие как дуоденальная жидкость, желчь, легочные образцы (индуцированная мокрота, бронхиальный смыв, биопсия) также могут быть окрашены.

Реагенты:

Эта процедура состоит из четырех этапов, требующих следующих растворов:

  1. Абсолютный метанол
  2. Кислотный спирт: 10 мл серной кислоты + 90 мл абсолютного этанола. Хранить при комнатной температуре.
  3. Kinyoun’s Carbol fuchsin: можно приобрести в коммерческих целях.
  4. 3% малахитовый зеленый: растворить 3 г малахитового зеленого в 100 мл дистиллированной воды. Хранить при комнатной температуре.
Процедура:
  1. Приготовьте мазок с 1–2 каплями образца на предметном стекле и высушите на предметном стекле при температуре 60°C до полного высыхания. Не делайте мазки слишком толстыми!
  2. Фиксация абсолютным метанолом на 30 секунд.
  3. Окрашивание карболовым фуксином Киньюна в течение одной минуты. Кратковременно промойте дистиллированной водой и слейте.
  4. Обезжирить кислым спиртом в течение 2 минут. Промыть дистиллированной водой и слить.
  5. Контрастное окрашивание малахитовым зеленым в течение 2 минут. Кратковременно промойте дистиллированной водой и слейте.
  6. Высушите на нагревателе для предметных стекол при 60°C в течение примерно 5 минут. Гора с покровным стеклом с помощью желаемого монтажного носителя.
  7. Осмотрите от 200 до 300 полей зрения, используя объективы 40x или выше. Для подтверждения внутренней морфологии используйте иммерсионный объектив с увеличением 100×.
Контроль качества:

Контрольное стекло Cryptosporidium spp. из образца, законсервированного 10% формалином, следует включать в каждый цикл окрашивания. Cryptosporidium spp. окрашивается в розово-красный цвет. Фон должен равномерно окрашиваться в зеленый цвет.

Процедура хромотропного окрашивания

Этот метод окрашивания был разработан в CDC с использованием различных компонентов метода окрашивания трихромом для дифференциации спор микроспоридий от фоновых фекальных элементов.

Образец:

Приготовьте тонкий мазок, используя приблизительно 10 мкл фиксированной 10% формалиновой взвеси кала (неконцентрированной) на предметном стекле. Можно также использовать концентраты формалина, но количество микроорганизмов будет практически таким же, как и до концентрирования. Зафиксировать на предметном стекле при температуре 60°C до полного высыхания (5-10 минут).

Реагенты:

Эта процедура состоит из шести этапов, требующих следующих растворов:

  1. Абсолютный метанол
  2. Хромотропное пятно:
    Хромотроп 2R 6,00 г
    Светлый зеленый 0,15 г
    Фосфорно-вольфрамовая кислота 0,70 г
    Ледяная уксусная кислота 3,00 мл

    Смешайте ингредиенты и дайте постоять 30 минут. Затем добавить 100 мл дистиллированной воды. Готовьте свежий для использования каждый месяц.

  3. Кислый спирт:
    90% этанол 995,5 мл
    Ледяная уксусная кислота 4,5 мл
  4. 95% этанол
  5. 100% этанол
  6. Ксилол или заменитель ксилола
Процедура:
  1. Фиксация мазка абсолютным метанолом на 5 минут.
  2. Поместите в хромотропную краску на 90 минут.
  3. Обезжирить в кислом спирте всего от 1 до 3 секунд.
  4. Промыть 95% этанолом путем погружения.
  5. Поместить в две смены 100% этанола на 3 минуты каждую.
  6. Поместите две смены ксилола или заменителя ксилола на 10 минут каждую.
  7. Слейте предметное стекло и поместите его вместе с покровным стеклом, используя монтажную среду (например, пермаунт). Исследуйте мазок после высыхания, используя не менее 100-кратного погружения объектива в масло или выше. Обследовать не менее 200–300 нефтеиммерсионных полей.
Контроль качества:

Контрольное стекло микроспоридий из образца, консервированного 10% формалином, должно быть включено в каждый цикл окрашивания. Споровые стенки микроспоридий окрашиваются в розовато-красный цвет и имеют размер около 1 мкм. Меняйте все растворы после окрашивания хромотропом через каждые 10 предметных стекол, чтобы добиться надлежащего ополаскивания и обезвоживания. Для точности рекомендуется микроскоп с хорошей оптикой. Используйте по крайней мере 100-кратное увеличение иммерсионного масла для обнаружения организмов; более высокие увеличения лучше. Из-за сложности идентификации этих мелких спор рекомендуется, чтобы второй считыватель подтвердил положительный диагноз.

Окрашивание по Граму Quick-Hot

Это альтернатива хромотропному окрашиванию, представляющая собой быстрый, надежный и простой метод окрашивания мазков для выявления спор микроспоридий в фекалиях и других клинических образцах.

Образец:

Приготовьте тонкий мазок окрашиваемого материала (например, фекалий, мочи, мокроты, слюны и надосадочной жидкости клеточных культур) и высушите на воздухе.

Фиксированные формалином и залитые в парафин срезы тканей депарафинизируйте, как обычно, гидратируйте в ряде спиртов и поместите предметные стекла в воду перед окрашиванием по Граму.

Реагенты:
  1. Набор для окрашивания по Граму
  2. Хромотропное пятно:
    Хромотроп 2R 1,0 г
    Светлый зеленый 0,15 г
    Фосфорно-вольфрамовая кислота 0,25 г
    Ледяная уксусная кислота 3,0 мл

    Смешайте сухие ингредиенты, затем добавьте уксусную кислоту. Дайте постоять 30 минут, а затем добавьте 100 мл дистиллированной воды. Готовьте свежий для использования каждый месяц.

  3. Кислый спирт:
    90% этанол 995,5 мл
    Ледяная уксусная кислота 4,5 мл
  4. 95% этанол
  5. 100% этанол

Примечание: В дополнение к перечисленным реагентам требуется метод нагревания реагентов и поддержания определенной температуры. Поскольку нагревать нужно только хромотропную краску, достаточно будет горячей плиты.

Процедура:
  1. Мазок с термофиксацией (3 раза по 1 секунде каждый на слабом огне или 5 минут на подогревателе предметных стекол при температуре 60°C). Остудить до комнатной температуры.
  2. Окрасьте по Граму, минуя стадию сафранина, следующим образом:
    1. Поместите предметные стекла в раствор генцианвиолета и оставьте на 30 секунд. Для срезов тканей увеличьте время до 1 минуты.
      2. №
    2. Аккуратно смойте излишки красителя водой.
    3. Опустите предметные стекла в раствор йода Грама и оставьте на 30 секунд. Для срезов тканей увеличьте время до 1 минуты.
    4. Удалите раствор йода Грама, осторожно промыв его раствором для обесцвечивания. Держите предметное стекло под углом и по каплям добавляйте обесцвечивающий раствор до тех пор, пока он не станет бесцветным. Будьте особенно осторожны на этом этапе, чтобы добиться правильного окрашивания спор.
    5. Аккуратно промойте предметное стекло холодной водой, чтобы удалить излишки раствора обесцвечивателя.
  3. Выполните хромотропное окрашивание следующим образом:
    1. Поместите предметное стекло в подогретый (от 50° до 55°C) хромотропный краситель не менее чем на 1 минуту. Для срезов тканей увеличьте время на 30 секунд.
    2. Промойте 90% раствором кислоты и спирта в течение 1–3 секунд. Будьте особенно осторожны на этом этапе, чтобы добиться правильного окрашивания спор.
    3. Промыть 95% этанолом в течение 30 секунд.
    4. Промойте дважды, каждый раз по 30 секунд, в 100% этаноле (для этого шага требуются два отдельных контейнера). Дайте высохнуть, затем закрепите Cytoseal60 (Stephens Scientific) или другим подходящим герметиком, следуя инструкциям. Для срезов тканей мы рекомендуем перед установкой предметные стекла кратковременно промыть в растворе 50% этилового спирта/50% ксилола в течение 15 секунд.
Контроль качества:

Контрольное стекло со спорами микроспоридий из образца, законсервированного 10% формалином, должно быть включено в каждый цикл окрашивания.

В образцах фекалий споры микроспоридий должны выглядеть как окрашенные в темный цвет фиолетово-яйцевидные структуры на бледно-зеленом фоне. Дрожжевые клетки, если они присутствуют, должны окрашиваться в темно-фиолетовый или розовато-красный цвет и легко отличимы от спор микроспоридий.

В цитологических препаратах споры микроспоридий должны окрашиваться от темно-фиолетового до розово-фиолетового цвета и могут содержать грамположительные гранулы. Иногда споры демонстрируют заметную полосу в виде экваториального пояса.

Ссылка:

Moura H, Schwartz DA, Bornay-Llinares F, et al 1997. Новый и усовершенствованный метод «быстро-горячего хромотропа», который дифференциально окрашивает споры микроспоридий в клинических образцах, включая срезы ткани, залитые парафином. Arch Pathol Lab Med.121:888-893.

Метод модифицированного сафранина (горячий метод) Процедура окрашивания

Для Cyclospora , Cryptosporidia и Cystoisospora видов:

Ооцисты из Cyclospora в клинических образцах обычно обнаруживают с помощью модифицированного кислотостойкого окрашивания (холод). Однако при использовании этого метода ооцисты окрашиваются по-разному: от неокрашенного до полного окрашивания, что может привести к ошибочной идентификации. Метод модифицированного сафранина дает более равномерное окрашивание этих ооцист. Пятно необходимо нагреть до кипения с помощью горячей плиты или микроволновой печи.

Образец:

Можно использовать концентрированный осадок свежего или законсервированного формалином стула. Другие типы клинических образцов, такие как дуоденальная жидкость, также могут быть окрашены.

 

Реагенты:
Эта процедура состоит из трех этапов, требующих следующих растворов:

  1. Кислотный спирт (3% HCl/метанол): медленно добавьте 3 мл соляной кислоты к 97 мл абсолютного метанола. Хранить при комнатной температуре в плотно закрытой таре.
  2. Окрашивание сафранином (доступно в наборах для окрашивания по Граму)
  3. 3% малахитовый зеленый: растворить 3 г малахитового зеленого в 100 мл дистиллированной воды. Хранить при комнатной температуре.
Процедура:
  1. Приготовьте тонкий мазок на предметном стекле и высушите на нагревателе для предметного стекла.
  2. Зафиксировать в кислом спирте на 5 минут.
  3. Промыть дистиллированной водой.
  4. Поместите в кипящий сафранин на 1 минуту.
  5. Промыть дистиллированной водой.
  6. Докрашивание малахитовым зеленым в течение 1 минуты.
  7. Кратковременно промыть дистиллированной водой.
  8. Высушите предметное стекло и закрепите его покровным стеклом, используя желаемую заливочную среду.
Контроль качества:

Контрольное стекло Cyclospora spp. из образца, законсервированного 10% формалином, следует включать в каждый цикл окрашивания. Cyclospora spp. ооцисты окрашиваются в красновато-оранжевый цвет. Фон должен равномерно окрашиваться в зеленый цвет.

 

Процедура окрашивания трихромом

Общепризнанно, что окрашенные фекальные пленки являются единственным наиболее эффективным средством исследования кала на кишечные простейшие. Постоянно окрашенный мазок облегчает обнаружение и идентификацию цист и трофозоитов и обеспечивает постоянную регистрацию встречающихся простейших. На окрашенном мазке часто видны мелкие простейшие, пропущенные при исследовании влажного препарата (как неконцентрированного, так и концентрированного образца). Техника трихрома Уитли для образцов фекалий является модификацией оригинальной процедуры окрашивания ткани Гомори. Это быстрая и простая процедура, позволяющая получить однородно хорошо окрашенные мазки кишечных простейших, клеток человека, дрожжей и артефактного материала.

Образец:

Образцы обычно состоят из свежего стула или стула, зафиксированного в поливиниловом спирте (ПВА), намазанного на предметные стекла микроскопа и высушенного на воздухе или на подогреве предметного стекла при температуре 60°C. Также можно использовать стул, консервированный в растворе ацетата натрия, уксусной кислоты и формалина (SAF), или некоторые фиксаторы в одном флаконе.

Реагенты:

Эта процедура состоит из семи этапов, требующих следующих растворов:

  1. 70% этанол плюс йод: приготовьте исходный раствор, добавляя кристаллы йода к 70% спирту, пока не получите темный раствор. Для использования разбавьте бульон 70% спиртом до получения темно-красновато-коричневого цвета или цвета крепкого чая.
  2. 70% этанол (дважды)
  3. Трихромный краситель: можно приобрести отдельно
  4. 90% кислый этанол
    90% этанол 99,5 мл
    Уксусная кислота (ледяная) 0,5 мл
  5. 95% этанол
  6. 100% этанол (дважды)
  7. Ксилол или заменитель ксилола (дважды)
Процедура:
  1. Для мазков ПВС поместите предметное стекло в 70% этанол с добавлением йода на 10 минут. Для других фиксаторов следуйте инструкциям производителя. Пропустите этап с йодом для консервантов, не содержащих хлорид ртути.
  2. Поместите слайд в 70% этанол на 5 минут.
  3. Поместить во второй 70% этанол на 3 минуты
  4. Поместите в трихромовый краситель на 10 минут.
  5. Обезжирить в 90% растворе этанола с уксусной кислотой в течение 1–3 секунд.
  6. Промойте несколько раз в 100% этаноле.
  7. Поместить в две смены 100% этанола на 3 минуты каждую.
  8. Поместите две смены ксилола или заменителя ксилола на 10 минут.
  9. Смонтируйте с покровным стеклом, используя монтажную среду (например, пермаунт).
  10. Исследуйте мазок под микроскопом, используя объектив 100×. Обследовать не менее 200–300 нефтеиммерсионных полей.
Контроль качества:

Контрольное стекло известных простейших, таких как Giardia spp. из образца, сохраненного ПВА, следует включать в каждый цикл окрашивания. При тщательной фиксации мазка и правильной окраске цитоплазма простейших трофозоитов будет иметь сине-зеленую окраску, иногда с фиолетовым оттенком. Кисты имеют тенденцию быть немного более фиолетовыми. Ядра и включения (хроматоидные тельца, эритроциты, бактерии) и кристаллы Шарко-Лейдена имеют красную окраску, иногда с фиолетовым оттенком. Гликоген растворяется в растворителях и появляется в организме в виде прозрачной области. Фоновый материал обычно окрашивается в зеленый цвет, обеспечивая приятный цветовой контраст с простейшими.

Процедура окрашивания Calcofluor White

Этот химиофлуоресцентный метод полезен для обнаружения микроспоридий, Acanthamoeba spp., Pneumocystis jiroveci и Dirofilaria spp. Химиофлуоресцентные агенты, такие как Calcofluor, Fungi-Fluor или Uvitex 2B, также известные как оптические отбеливатели, являются быстродействующими и недорогими агентами для скрининга. Эти реагенты чувствительны, но неспецифичны, поскольку многие объекты и организмы, кроме паразитов, могут флуоресцировать. Этот тест следует использовать в качестве инструмента быстрого скрининга, а не для идентификации видов.

Образец:

Приготовьте тонкий мазок, используя примерно 10 мкл свежих или консервированных образцов на предметном стекле. Образцы могут включать стул, мочу, культуру или другие типы образцов. Зафиксировать на предметном стекле при температуре 60°C до полного высыхания (5-10 минут).

Реагенты

Эта процедура состоит из двух этапов, требующих следующих растворов:

  1. Абсолютный метанол
  2. 0,01 % реагент Calcofluor white: приготовьте 0,01 % раствор в 0,1 М трис-буферном солевом растворе, pH 7,2

Процедура

  1. Приготовьте тонкий мазок фекального, культурального или другого образца материала.
  2. Зафиксируйте мазок метанолом на 30 секунд.
  3. Окрашивание 0,01% реагентом Calcofluor White в течение 1 минуты.
  4. Промойте дистиллированной водой и дайте мазку высохнуть.
  5. Маунт с покровным стеклом №1 по толщине.
  6. Исследование с помощью УФ-флуоресцентного микроскопа, оснащенного сине-фиолетовым кубическим фильтром с длиной волны 400 нм или менее.
  7. Для скрининга микроспоридий исследуйте мазок с помощью масляного иммерсионного объектива 50× или 100×. Споры микроспоридий флуоресцируют ярким сине-белым цветом на черном фоне.
Контроль качества

Контрольное стекло микроспоридий, консервированных в 10% формалине, приготовленное из культуры или образца стула, должно быть включено в каждый цикл окрашивания.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *