Разное

Печатная ж: Как правильно писать печатные русские буквы

Содержание

Как правильно писать печатные русские буквы

Дорогие родители!

Очень важно, чтобы наши детки научились правильно держать карандаш и ручку в руке. Неправильный захват карандаша ведёт к быстрому уставанию ребёнка при письме, у него не получаются ровные линии, в дальнейшем могут возникнуть проблемы с осанкой и зрением, если он очень близко нагибается к листу. Вы должны обратить внимание на положение карандаша в руке в дошкольном возрасте малыша, иначе потом его будет почти невозможно переучить. Поэтому мы публикуем для вас подробное объяснение, как правильно держать письменные принадлежности. 

Важно всё время обращать на это внимание! При выполнении домашнего задания или при рисовании пока этот навык не будет доведён до автоматизма.

 

Ещё советы по обучению малыша правильному захвату вы можете почитать здесь: http://pediatriya.info

В этой же статье хотим вам дать схему правильного написания русских печатных букв. Схема написания отличается от совпадающих латинских букв, поэтому очень важно правильно писать по определённой схеме. Если мы не будем соблюдать эти правила, то на письме у малышей возникают ошибки, например, вместо русской И они автоматически пишут немецкую N, или переворачивают буквы в зеркальном отражении. Соблюдение правильной схемы написания букв поможет также в дальнейшем в написании письменных букв. Им будет легче освоить правильное соединение букв. 

Обращаем ваше внимание, что частая ошибка нащих детей это написание вертикальных палочек снизу вверх , когда правильно писать надо сверзу вниз! Ребятам сначала кажется, что так легче, потому что они видят линию строки и отталкиваются от неё, но на самом деле, так писать сложнее – линии получаются неровными и кривыми, также происходит большое количество отрывов карандаша от бумаги. 

Схема написания русских печатных букв. 

 Желаем вам удачи в обучении наших двуязычных детей!  

(картинки с сайта: http://www.notabene.ru)

%d0%bf%d0%b5%d1%87%d0%b0%d1%82%d0%bd%d0%b0%d1%8f%20%d0%bc%d0%b0%d1%88%d0%b8%d0%bd%d0%b0 — с русского на все языки

Все языкиАнглийскийРусскийКитайскийНемецкийФранцузскийИспанскийШведскийИтальянскийЛатинскийФинскийКазахскийГреческийУзбекскийВаллийскийАрабскийБелорусскийСуахилиИвритНорвежскийПортугальскийВенгерскийТурецкийИндонезийскийПольскийКомиЭстонскийЛатышскийНидерландскийДатскийАлбанскийХорватскийНауатльАрмянскийУкраинскийЯпонскийСанскритТайскийИрландскийТатарскийСловацкийСловенскийТувинскийУрдуФарерскийИдишМакедонскийКаталанскийБашкирскийЧешскийКорейскийГрузинскийРумынский, МолдавскийЯкутскийКиргизскийТибетскийИсландскийБолгарскийСербскийВьетнамскийАзербайджанскийБаскскийХиндиМаориКечуаАканАймараГаитянскийМонгольскийПалиМайяЛитовскийШорскийКрымскотатарскийЭсперантоИнгушскийСеверносаамскийВерхнелужицкийЧеченскийШумерскийГэльскийОсетинскийЧеркесскийАдыгейскийПерсидскийАйнский языкКхмерскийДревнерусский языкЦерковнославянский (Старославянский)МикенскийКвеньяЮпийскийАфрикаансПапьяментоПенджабскийТагальскийМокшанскийКриВарайскийКурдскийЭльзасскийАбхазскийАрагонскийАрумынскийАстурийскийЭрзянскийКомиМарийскийЧувашскийСефардскийУдмурдскийВепсскийАлтайскийДолганскийКарачаевскийКумыкскийНогайскийОсманскийТофаларскийТуркменскийУйгурскийУрумскийМаньчжурскийБурятскийОрокскийЭвенкийскийГуараниТаджикскийИнупиакМалайскийТвиЛингалаБагобоЙорубаСилезскийЛюксембургскийЧерокиШайенскогоКлингонский

 

Все языкиАнглийскийТатарскийКазахскийУкраинскийВенгерскийТаджикскийНемецкийИвритНорвежскийКитайскийФранцузскийИтальянскийПортугальскийТурецкийПольскийАрабскийДатскийИспанскийЛатинскийГреческийСловенскийЛатышскийФинскийПерсидскийНидерландскийШведскийЯпонскийЭстонскийЧеченскийКарачаевскийСловацкийБелорусскийЧешскийАрмянскийАзербайджанскийУзбекскийШорскийРусскийЭсперантоКрымскотатарскийСуахилиЛитовскийТайскийОсетинскийАдыгейскийЯкутскийАйнский языкЦерковнославянский (Старославянский)ИсландскийИндонезийскийАварскийМонгольскийИдишИнгушскийЭрзянскийКорейскийИжорскийМарийскийМокшанскийУдмурдскийВодскийВепсскийАлтайскийЧувашскийКумыкскийТуркменскийУйгурскийУрумскийЭвенкийскийБашкирскийБаскский

Последние новости и события

ФИО Наименование работы, ее вид Форма работы (печатн. или электрон.) Выходные данные (место издания, издательство, год издания) Объем, п.л.
1. Доржиев С.Ж.. Современное состояние фермерства в Бурятии Печатная Устойчивое развитие сельских территорий: материалы IV межрегиональной науч.-практ. конф.- Улан-Удэ: Издательство БГСХА им. В.Р. Филиппова, 2014. – С. 60-61. 0,3
2. Доржиев С.Ж.. Изменение живой массы бычков разной кровности Печатная Сборник материалов 8-й Международной науч.-практ. конф., НАУЧНЫЙ ПОИСК В СОВРЕМЕННОМ МИРЕ,: г. Махачкала, ООО «Апробация», 2015- С. 58-59. 0,2
3. Доржиев С.Ж.. Аспекты развития мясного скотоводства Бурятии Печатная Сборник материалов VII Международная научно –практическая конференция «ПЕРПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ В 21 ВЕКЕ», Махачкала, ООО «Апробация», 2015- С. 58-60. 0,2
4. Доржиев С.Ж.. Влияние гибридизации на рост и развитие бычков Печатная Журнал «Молочное и мясное скотоводство», 2015, №5, 36-38 с. 0,2
5. Доржиев С.Ж.. Энергетический обмен у коров Печатная Сборник материалов VI Международной научно – практической конференции «ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ В 21 ВЕКЕ»: г. Махачкала, ООО «Апробация», 2014- С. 66-68. 0,2
6. Тохметов Т.М. Переваримость питательных веществ у коров Печатная Сборник материалов VI-й Международной науч.-практ. конф., Часть-2. «ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ РАЗВИТИЯ СОВРЕМЕННОЙ НАУКИ»: г. Махачкала, ООО «Апробация», 2014- С. 62-64. 0,2
7. Тохметов Т.М. Влияние зерносенажа на динамику рубцового пищеварения коров Печатная Сборник материалов VI-й Международной науч.-практ. конф., «актуальные проблемы современной науки в 21 веке»: г. Махачкала, ООО «Апробация», 2014- С. 77-79. 0,2
8. Тохметов Т.М. Влияние рациона на химический состав молока Печатная Сборник материалов VIII-й Международной науч.-практ. конф., НАУЧНЫЙ ПОИСК В СОВРЕМЕННОМ МИРЕ,: г. Махачкала, ООО «Апробация», 2015- С. 60-62. 0,2
9. Тохметов Т.М. Баланс азота в организме коров Печатная Сборник материалов VII Международная научно –практическая конференция «ПЕРПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ В 21 ВЕКЕ», Махачкала, ООО «Апробация», 2015- С. 60-61. 0,2
10. Тохметов Т.М. Переваримость кормов бычками Печатная  Сборник материалов VII Международная научно-практическая конференция «ТЕОРЕТИЧЕСКЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ РАЗВИТИЯ СОВРЕМЕННОЙ НАУКИ», г. Махачкала, ООО «Апробация», МАРТ, 2015- С. 97-99. 0,2
11. Бадмаева О.Б. Выявление Y.pseudotuberculosis у серопозитивных на бруцеллез овец Печатная 1 региональная научно-практическая конференция микробиологов. – Владивосток, 2014 0,4
12. Бадмаева О.Б. Некоторые аспекты эпизоотологии сибирской язвы в Монголии (Статья) Печатная Ж.Вестник Саратовского ГАУ им.Вавилова. – Саратов, 2014- №6. – С.3-5. 0,4
13. Бадмаева О.Б. Усовершенствование проведения эпизоотологического мониторинга с учетом факторов окружающей среды (Статья) Печатная Мат-лы Межрегиональной научно-практ.конференции «Устойчивое развитие сельских территорий». – Улан-Удэ, 2014. – С.9-12 0,6
14. Бадмаева О.Б. Cерологические исследования крови овец в сопредельных районах Бурятии и Монголии (Статья) Печатная Ж.Ветеринария. – М.: 2014. – №8. – С.12-14 0,4
15. Бадмаева О.Б. Инфекционная энтеротоксемия овец в Бурятии и Монголии Печатная Дальневосточный аграрный вестник. –  Благовещенск: ДальГАУ, 2014. – № 4(32). – С.28-33 0,6
16. Бадмаева О.Б. Использование ПЦР для выявления генома B.anthracis в почве Печатная Сб.научн.тр. по материалам МНПК «Перспективы развития науки и образования». 28.02.2015. – Ч.2. – Тамбов: ООО «Консалтинговая компания Юком», 2015. – С.20-21 0,2
17. Бадмаева О.Б. Аспекты эпизоотического проявления инфекционной энтеротоксемии овец в Монголии Печатная Ж.Ветеринария и кормление. – М., 2015. – №2. – С.34-38 0,6
18. Бадмаева О.Б. Микробиологический мониторинг дикой фауны национального парка «Тункинский» Печатная Вестник КрасГАУ. – Красноярск, 2015. – №7. – С.
0,7
ИТОГО: 6,0

Печатные платы – глоссарий. Производство и монтаж печатных плат

  • бессвинцовая пайка Англ. lead-free soldering

    Бессвинцовая пайка представляет собой припой, который не содержит в своем составе свинца. Данный метод получил свое распространение в ходе удаления свинца из процесса производства для минимизации экологических угроз и вреда здоровью человека, а также для повышения качества охраны труда. 

  • трассировка печатных плат Англ. PCB routing

    Трассировка печатных плат — это один из шагов проектирования, который представляет собой процесс определения места и реализации проводящего рисунка платы.

  • печатная плата Англ. printed circuit board

    На сегодняшний день всем известно, что печатные платы являются составной частью любого электронного изделия. Однако еще в прошлом веке они были по-настоящему революционной инновацией, которая изменила весь мир.

  • трафаретная печать печатной платы Англ. stencil screen printing

    Трафаретная печать печатной платы — один из основных способов нанесения паяльной пасты на печатную плату. Данный прием является наиболее популярным при осуществлении поверхностного монтажа. 

  • электротестирование печатных плат Англ. electrical testing

    Электротестирование – один из объективных методов контроля печатных плат на наличие обрывов и замыканий с измерением поверхностного сопротивления.

  • сушка печатных плат Англ. drying of printed circuit boards

    Сушка печатных плат — это процесс их нагрева в специальном оборудовании для предотвращения расслоения из-за попадания влаги внутрь печатной платы.

  • классификация печатных плат Англ. PCB classification

    Классификация печатных плат происходит по нескольким признакам. Здесь будут рассмотрены основные.

  • паяльная паста Англ. solder paste

    Паяльная паста – это смесь, которая имеет в своем составе такие компоненты, как:

  • cборка печатных плат Англ. PCB assembly

    Сборка печатных плат – это процесс установки различных компонентов на печатную плату.

    Сборка подразумевает собой монтаж компонентов. Монтаж в свою очередь бывает  трех видов:

    • SMT (surface mount technology) – поверхностный монтаж

    • THT (Through hole technology), выводной монтаж

    • THT + SMT – выводной + поверхностный монтаж (смешанный)

  • BGA Англ. BGA

    BGA (ball grid array) – тип корпуса микросхем, с шариковыми выводами из припоя нанесёнными на контактные площадки с обратной стороны микросхемы.

  • срок хранения печатных плат Англ. printed circuit boards shelf life

    Срок хранения печатных плат может различаться в зависимости от вида финишного покрытия. При этом стоит заметить, вид печатной платы (многослойная, гибкая, свч и т. д.) не влияет на срок хранения.

  • HDI печатные платы Англ. HDI printed circuit boards

    HDI (High Density Interconnect) печатные платы – это платы, которые имеют повышенную плотность трассировки на единицу площади поверхности в сравнении с обычными многослойными печатными платами.

  • шариковый вывод Англ. ball

    Металлические выпуклости, расположенные на монтажной поверхности корпуса компонента, используемые для создания соединения в следующей иерархии межсоединений.

  • ускоренное испытание на долговечность Англ. accelerated life test

    Испытания, при которых такие параметры, как напряжение и температура, повышены относительно нормальных условий эксплуатации, для получения экспериментальных результатов старения за относительно короткий период времени.

  • трафаретная печать Англ. screen printing

    Процесс переноса изображения на поверхность путем продавливания подходящего материала ракелем сквозь сито с нанесенным на него изображением.

  • ПЕЧАТНАЯ ПРОДУКЦИЯ

      ЖУРНАЛЫ ПО ОХРАНЕ ТРУДА
    Ж 1 Журнал регистрации инструктажа на рабочем месте 
    Ж 2 Журнал вводного инструктажа.
    Ж 3 Журнал инструктажа по охране труда для лиц сторонних организаций.
    Ж 4 Журнал учета присвоения группы I по электробезопасности неэлектрическому персоналу.
    Ж 5 Журнал учета проверки знаний и правил работы в электроустановках.
    Ж 6 Журнал проверки знаний Правил технической эксплуатации тепловых энергоустановок.
    Ж 7 Журнал регистрации проверки знаний работников по охране труда
    Ж 8 Журнал учета проверок юридического лица, ИП, проводимых органами госконтроля (надзора)
    Ж 9 Журнал трёхступенчатого контроля (объединённый).
    Ж 10 Журнал регистрации несчастных случаев на производстве.
    Ж 11 Журнал учёта выдачи инструкций по охране труда.
    Ж 12 Журнал учета инструкций по охране труда.
    Ж 13 Журнал учёта занятий по охране труда.
    Ж 14 Журнал учета занятий по гражданской обороне.
    Ж 15 Журнал контроля за состоянием охраны труда и противопожарной безопасности.
    Ж 16 Журнал по технике безопасности (повторный).
    Ж 17 Журнал инспекционных проверок
    Ж 18 Журнал аварийных тренировок.
    ЖУРНАЛЫ ПО ПОЖАРНОЙ БЕЗОПАСНОСТИ
    Ж 21 Журнал учета инструктажей по пожарной безопасности.
    Ж 22 Журнал регистрации противопожарного инструктажа на рабочем месте
    Ж 23 Журнал регистрации вводного противопожарного инструктажа
    Ж 24 Журнал по учету противоаварийных, противопожарных тренировок.
    Ж 25 Журнал осмотра помещений перед их закрытием.
    Ж 26 Журнал учета огнетушителей.
    Ж 27 Журнал технического обслуживания огнетушителей.
    Ж 28 Журнал учета проверки наличия и состояния огнетушителей
    Ж 29 Журнал контроля состояния первичных средств пожаротушения
    Ж 30 Журнал регистрации работ по ТО и ремонту автоматических установок пожаротушения, п-о сигнализации.
    Ж 31 Паспорт  автоматических  установок пожаротушения, дымоудаления, охранной, пожарной сигнализации.
    ЖУРНАЛЫ ПО ОБСЛУЖИВАНИЮ ЭЛЕКТРООБОРУДОВАНИЯ И ЛИФТАМ
    Ж 35 Оперативный журнал.
    Ж 36 Журнал для оперативно-ремонтного персонала.
    Ж 37 Журнал учёта и содержания средств защиты и приспособлений.
    Ж 38 Журнал учёта, проверки и испытания электроинструмента и вспомогательного оборудования к нему.
    Ж 39 Журнал записи результатов проверки инструментов и предохранительных приспособлений.
    Ж 40 Журнал учета проверки и содержания электрозащитных средств приспособлений ручного электроинструмента и сварочных аппаратов
    Ж 41 Журнал профилактического ремонта электрооборудования.
    Ж 42 Журнал учета работ по нарядам и распоряжениям.
    Ж 43 Журнал дефектов и неполадок электрооборудования.
    Ж 44 Журнал учета проверок заземления электрооборудования
    Ж 45 Журнал ежесменного осмотра лифтов.
    Ж 46 Журнал учета выдачи ключей от машинных и блочных помещений лифтов.
    Ж 47 Журнал учета инцидентов, произошедших на лифтах
    Ж 48 Журнал сведения об авариях на лифтах
    Ж 49 Журнал заявок
    ЖУРНАЛЫ  СТРОИТЕЛЬНЫХ РАБОТ
    Ж 50 Журнал авторского надзора за строительством
    Ж 51 Общий журнал работ.
    Ж 52 Журнал производства работ
    Ж 53 Журнал монтажных работ
    Ж 54 Журнал бетонных работ.
    Ж 55 Журнал №_   ухода за бетоном
    Ж 56 Журнал сварочных работ и антикоррозийной защиты.
    Ж 57 Журнал производства работ по строительству инженерных сооружений.
    Ж 58 Журнал учета выдачи нарядов- допусков на выполнение работ повышенной опасности
    Ж 59 Крановый журнал
    Ж 60 Вахтенный журнал крановщика.
    Ж 61 Журнал грузоподъемной машины.
    Ж 62 Журнал строительной машины.
    Ж 63 Журнал крановщика самоходного автомобильного крана
    Ж 64 Журнал приема-сдачи электропогрузчиков
    ЖУРНАЛЫ ПО КОНТРОЛЮ ТЕХНИЧЕСКИХ СИСТЕМ.
    Ж 65 Журнал учета и осмотра такелажных средств, механизмов и приспособлений.
    Ж 66 Журнал приемки и осмотра лесов и подмостей.
    Ж 67 Журнал учета и периодического осмотра съемных грузозахватных приспособлений и тары.
    Ж 68 Журнал  входного учета контроля  качества получаемых  деталей материалов конструкций  и оборудования
    Ж 69 Аккумуляторный журнал.
    Ж 70 Журнал регистрации технического состояния аккумуляторных батарей.
    Ж 71 Журнал технического освидетельствования тары
    Ж 72 Книга учета и освидетельствования сосуда
    Ж 73 Журнал контрольных проверок манометров.
    Ж 74 Журнал учета и осмотра стропов
    ЖУРНАЛЫ ПО БЕЗОПАСНОСТИ ДВИЖЕНИЯ.
    Ж 75 Журнал по проведению инструктажей с водительским составом по безопасности движения.
    Ж 76 Журнал учета выхода автомобиля на линию и возврата с линии.
    Ж 77 Журнал предрейсового осмотра водителей.
    Ж 78 Журнал учета движения путевых листов.
    Ж 79 Журнал учета ДТП (сведения подлежащие сверке с ОВД).
    Ж 80 Журнал учета ДТП (сведения внутреннего характера).
    РАЗНОЕ.
    Ж 81 Сменный журнал операторов котельной.
    Ж 82 Журнал записи нарядов и выполнения работ.
    Ж 83 Журнал выдачи защитных средств.
    Ж 84 Книга приема и выдачи ключей
    Ж 85 Журнал учета потребления электроэнергии
    ЖУРНАЛЫ ПО КАДРОВОМУ ДЕЛОПРОИЗВОДСТВУ.
    ЖК 1 Журнал регистрации приема на работу
    ЖК 2 Журнал регистрации увольнений с работы
    ЖК 3 Журнал регистрации приказов по личному составу
    ЖК 4 Журнал регистрации приказов по очередным отпускам
    ЖК 5 Журнал регистрации переводов работающих
    ЖК 6 Журнал учета трудовых договоров
    ЖК 7 Журнал учета больничных листов
    ЖК 8 Журнал учета личных карточек
    ЖК 9 Журнал учета выдачи справок о заработной плате, стаже, месте работы
    ЖК 10 Журнал регистрации копий трудовых книжек
    ЖК 11 Книга учета движения трудовых книжек и вкладышей к ним
    ЖК 12 Приходно-расходная книга по учету бланков трудовых книжек и вкладышей к ним

    Журнал общей химии, официальный сайт, правила для авторов

    Журнал общей химии (ЖОХ) является одним из крупнейших российских научных журналов, отражающих основные направления развития химии. ЖОХ является преемником первого российского химического журнала ”Журнал русского химического общества”, основанного в 1869 году для освещения исследовательской и научно-общественной деятельности русских химиков. На его страницах впервые были напечатаны труды классиков русской химии, в частности работы Д. И. Менделеева по созданию и развитию периодической системы элементов и А. М. Бутлерова, связанные с разработкой его теории строения органических соединений; исследования Н. А. Меншуткина, Д. П. Коновалова, В. Ф. Алексеева, Н. С. Курнакова, А. А. Яковкина, В. А. Кистяковского, Л. А. Чугаева в области неорганической и физической химии; В. В. Марковникова, Е. Е. Вагнера, А. М. Зайцева, С. Н. Реформатского, А. Е. Фаворского, В. Е. Тищенко, М. И. Коновалова, Н. Д. Зелинского, С. В. Лебедева, А. Е. Арбузова в области органической химии. 
    В настоящее время журнал публикует работы, посвящённые актуальным общим вопросам химии и проблемам, возникающим на стыке различных разделов химии, а также на границах химии и смежных с ней наук (металлоорганические соединения, элементоорганическая химия, органические и неорганические комплексы, механохимия, нанохимия и т. д.). Наряду с оригинальными научными статьями в Журнале общей химии публикуются итоговые обзоры, дискуссионные статьи, краткие предварительные сообщения о новейших научных достижениях, требующие срочной публикации для закрепления приоритета и представленные в форме писем в редакцию и сообщения по материалам научных конференций. Журнал представляет интерес как для исследователей, осуществляющих научно-исследовательскую деятельность в области химии, так и специалистов, работающих в различных областях химической промышленности.
    Журнал общей химии издаётся ИКЦ Академкнига. Журнал одновременно выходит на английском языке под названием 

    «Russian Journal of General Chemistry» 

    в издательстве Pleiades Publishing, Ltd. (дистрибьютор — Springer). 


    Журнал общей химии включён в список журналов ВАК, индексируется и реферируется Academic OneFile, Academic Search, Catalysts and Catalysed Reactions, ChemWeb, Chemical Abstract Service (CAS), Chemistry Citation Index, Current Abstracts, Current Chemical Reactions, Current Contents/Physical, Chemical and Earth Sciences, EBSCO, Gale, Google, INIS AtomIndex, Index Chemicus, Journal Citation Reports/Science Edition, Mass Spectrometry Bulletin, OCLC, Reaction Citation Index, Reaxys, SCOPUS, Science Citation Index, Science Citation Index Expanded, Summon by Serial Solutions.
     

    Учредитель:

    Российская академия наук

     

    Журнал издается под руководством Отделения химии и наук о материалах Российской академии наук

     

    Журнал выпускается ИКЦ “Академкнига”

    Генератор прописей печатных букв – Развитие ребенка


    Генератор прописей печатных букв от Childdevelop

    Прописи – это такой тренажёр, который поможет обучить письму. По нему занимаются первоклассники в школах вместе с учителем или же дома, выполняя домашнее задание. Эффективность данного способа давно доказана, и именно поэтому он настолько распространён. Прописи можно приобрести в магазинах, но немногие знают, что тратиться на них необязательно. Вы и сами сможете создать их для своего ребёнка, сэкономив при этом семейный бюджет. В этом поможет генератор заданий прописей печатных букв.

    В чем заключаются преимущества генератора прописей печатных букв

    Этот вариант отличается прежде всего тем, что абсолютно бесплатный, в отличие от уже готового бумажного. Все, что нужно сделать – это пройти простую регистрацию на сайте, которая займёт одну минуту. Также ее можно пройти через социальные сети. После авторизации будете сами создавать прописи печатных букв на украинском, английском и русском языках для своего ребёнка. Таким образом есть возможность прорабатывать выявленные, например, во время занятий проблемные места, создав индивидуальную пропись.

    Ещё одно преимущество заключается в том, что сам процесс генерации очень прост, ему не нужно обучаться. Все, что нужно сделать, – это создать несколько столбцов и также строчек. Для одной прописи возможно создать одиннадцать строчек, в каждой из них находится не более двадцати символов. Вы можете поместить на одной строчке как буквы, так слова, или же целые словосочетания, если данное необходимо. К тому же при необходимости есть возможность выбрать цвет строчки, например, серый или чёрный по вашему желанию. Готовый вариант появится на сайте в специальном окошке справа, так что Вы заранее посмотрите, что в итоге получилось. Если что-то не устраивает, то внесите изменения. Плюсом является также и тот момент, что нет каких-то ограничений в количестве создания заданий.

    Создание прописей печатных букв – это довольно легкий процесс, который не займёт много времени. Он без сомнения станет отличным тренажёром, с помощью которого ребенок сам сможет научиться писать красиво. А в этом Вам, конечно же, поможет генератор прописей печатных букв. Это абсолютно бесплатно, так почему бы и не воспользоваться такой уникальной возможностью!

    Словарь терминов по графическому дизайну, допечатной подготовке и печати

    Этот словарь охватывает терминологию графического дизайна, допечатной подготовки и печати
    Щелкните букву, чтобы увидеть дополнительные термины в этом глоссарии, касающиеся макета, печати и переплета

    A – B – C – D – E – F – G – H – I – J – K – L – M – N – O – P – Q – R – S – T – U – V – W – X – Y –Z – 0-9–.

    W&B

    Аббревиатура от Work and Back , метода печати, при котором передняя и задняя страницы собираются на двух разных пластинах. Печать выполняется путем переворачивания страницы после печати первой стороны и использования тех же захватов и боковых направляющих.Этот прием еще называют листовым.

    W&T

    Аббревиатура от Work and Turn , метода печати, при котором обе стороны листа могут быть напечатаны с использованием одной пластины. Бумага переворачивается после печати первой стороны, используя тот же край первого отпечатка, что и край захвата для второго отпечатка. Для каждого прохода используются разные боковые направляющие.

    вафля

    Скручивание отпечатанной бумаги в областях с высокой плотностью чернил, вызванное механической нагрузкой на бумагу, когда она отделяется от офсетного полотна на офсетной машине.

    проход

    Термин, обозначающий ухудшение качества изображения в области изображения в процессе печати. Обычно это происходит при длительных пробежках.

    мойка

    Процедура очистки определенных чернил со всех печатающих элементов (роликов, пластины, фонтана и т. Д.) Печатной машины. Некоторые цвета чернил требуют многократной смывки, чтобы избежать загрязнения чернилами и химикатов.

    отходы

    Планируемый брак. При тираже определенное количество листов тратится впустую при правильной настройке цветов и регистрации.

    водяной знак

    Рисунок, отпечатанный или внедренный в бумагу в процессе производства. Это легко увидеть, если поднести бумагу к свету.

    WCS

    Аббревиатура от Windows Color System , механизма управления цветом, включенного в операционные системы Microsoft, такие как Vista и Windows 7. Его цель – добиться согласованности цвета в различных программных и аппаратных решениях, включая камеры, мониторы, принтеры и сканеры.

    паутина

    Рулон бумаги, используемый для рулонной или ротационной печати. Для получения дополнительной информации о рулонных печатных машинах посетите раздел печати на этом сайте.

    паутина

    Разрыв рулона рулона в процессе печати.

    рост сети

    Деформация бумаги, напечатанной на рулонном прессе. Физическая деформация происходит, когда бумага впитывает чернила и воду, и ускоряется с давлением и натяжением. Факторы, способствующие разрастанию полотна, включают тип печатной машины, конфигурацию печатной машины, бумагу, влажность, покрытие чернилами и состояние полотна.Изменение ширины полотна также происходит при использовании широкополосной флексографии и глубокой печати. При использовании флексографской и глубокой печати с промежуточными сушилками горячим воздухом ширина полотна будет уменьшаться при прохождении через пресс из-за потери влаги бумагой из-за сушки горячим воздухом. Рост сети в направлении ширины был вызван веером. Раздвижные ролики или ролики со спиральной лентой помогают свести к минимуму эту проблему. Некоторые рулонные печатные машины использовали систему Файфа или серию S-роликов, чтобы минимизировать проблему.

    смещение полотна

    Процесс литографической печати, при котором выполняется печать на бумаге с непрерывного рулона и доставка на другой рулон или в виде фальцованных подписей.На этом сайте есть специальная страница о печати.

    рулонный пресс

    Печатный станок для печати на рулонах бумаги. Этот тип печатной машины обычно используется для печати газет, журналов, больших каталогов или других работ, где количество оттисков превышает 25 000 экземпляров. Поскольку рулонный пресс «протягивает» непрерывный кусок бумаги через пресс, можно использовать более легкую бумагу. Многие рулонные печатные машины могут выполнять фальцовку сложных почтовых рассылок и брошюр.

    натяжение полотна

    Термин, используемый для натяжения или вытягивания, оказываемого прессом полотна на рулон полотна.

    Интернет-печать

    Система или процесс, позволяющий клиентам заказывать и, возможно, создавать и редактировать печатные публикации с помощью подключения к Интернету. Заказ на печать через Интернет или онлайн-печать используется для самых разных приложений, включая визитки, канцелярские товары, плакаты и фотокниги. Эта технология также известна как Web2Print или удаленная публикация.

    свадебная бумага

    Мягкая толстая бумага, хорошо держится при тиснении.

    прополка

    Процесс удаления излишков винила с отклеиваемых виниловых наклеек или наклеек.

    вес

    Сравнительная степень черноты шрифтового стиля. Гарнитуры разного веса имеют такие названия, как светлый, полужирный, полужирный или сверхжирный.

    мокрая печать

    Печать одного триадного цвета поверх другого, пока он еще влажный.

    мокрая ловушка

    Способность красящей пленки впитывать последующие красящие пленки.

    WF

    Аббревиатура для Wrong Font – используется для обозначения на пробном отпечатке символа неправильного шрифта.

    баланс белого

    Балансировка цветов для создания чистого белого цвета при сканировании или ретуши изображения

    белый свет

    Освещение, например солнечный свет, состоящее из всех цветов света в спектре. Компоненты видимого спектра можно увидеть в радуге или в солнечном свете, сияющем через призму.

    пробел или пробел

    В макете пробел – это пустая область между символами или графическими областями.

    вдова

    Последняя строка абзаца, которая появляется вверху страницы сама по себе.По-голландски это называется «hoerenjong» (сын шлюхи).

    заводной

    Торсионный эффект от крутящего момента, ведущего ходовой винт дальше выходного сигнала.

    окно

    – Прозрачная, обычно прямоугольная или квадратная, открытая панель на лито-негативе для снятия полутоновых негативов на место с помощью ленты.
    – Часть экрана компьютера, которая используется для отображения сообщения или изображения. Окна можно открывать и закрывать, изменять их размер и реорганизовывать.

    оконный конверт

    Конверт с отверстием спереди, закрытый прозрачной пленкой.Через это окно можно увидеть адрес, напечатанный на бумаге внутри.

    протирка на пластине

    Пластина, на которую нанесено светочувствительное покрытие с помощью устройства для нанесения покрытия; Обычно это первый шаг в изготовлении форм для этого типа.

    провод

    Проволочная сетка, используемая на мокрой стадии производства бумаги. Проволока определяет текстуру бумаги.

    Провод-О

    Название переплетной мастерской для переплета книг с использованием двойных петель проволоки через отверстие.

    сторона провода

    Нижняя сторона бумаги, которая опирается на проволоку, когда ее переносят во время изготовления.Противоположная верху, фетровая сторона.

    проволочная вышивка

    Для скрепления листов, подписей или разделов проволочными скобами.

    с зерном

    Фальцовка или подача бумаги в пресс или папку параллельно волокнам бумаги.

    WMF

    Аббревиатура Windows Metafile Format : собственный формат файлов для изображений на платформе Windows.

    колебание

    Наклон оси при вращении.

    ксилография

    Древняя техника рельефной печати, также называемая блочной печатью или ксилографией.

    бездревесная бумага

    Бумага только из химической целлюлозы.

    обработка текста

    Компьютерные программы, которые фиксируют нажатия клавиш для поиска и редактирования данных или текста.

    перенос слов

    Способность текстового редактора автоматически заканчивать строку и переносить следующие слова на следующую строку.

    с обратной связью

    См. Sheetwise

    не работает

    См. Работа и работа

    машинный

    Макет, в котором обе стороны листа могут быть напечатаны с использованием одной пластины.Бумага переворачивается после печати первой стороны, так что задний край первого отпечатка становится краем захвата для второго отпечатка. Для обоих проходов используется одна и та же боковая направляющая.

    одноразовое

    Макет, в котором обе стороны листа могут быть напечатаны с использованием одной пластины. Бумага переворачивается после печати первой стороны, используя тот же край первого отпечатка, что и край захвата для второго отпечатка. Для каждого прохода используются разные боковые направляющие.

    рабочий процесс

    В допечатной подготовке рабочий процесс относится к программному обеспечению, которое используется для обработки всех процессов, необходимых для подготовки цифровых файлов к печати.

    рабочая станция

    Компьютер, который мощнее персональных компьютеров (например, ПК или Mac).

    ЧЕРВЬ

    Аббревиатура от «Записывай один раз, считывай много» . Образ оптического диска WORM можно создать только один раз, и данные нельзя стереть. Количество считываний данных не ограничено.

    тканая бумага

    Гладкая бумага на тонко структурированной проволоке, которая придает бумаге нежный узор.

    WPD

    Аббревиатура для обозначения принтера Windows Описание : версия Microsoft стандартного привода принтера PostScript (PPD).

    wratten желатиновый фильтр

    Тонкий цветной пластик, оптически чистый, используемый для разделения цветов в фотографических системах. Номер фильтра Wratten определяет цвет фильтра.

    морщин

    Неравномерно высушенная поверхность печатных красок.

    бумага писчая

    Другое название высокосортной бумаги.

    неправильный шрифт

    Знак корректора, указывающий, что шрифт использует неправильный шрифт или неправильный шрифт.

    неверное чтение

    Зеркальное отображение (боковой переворот) изображения, читаемого вправо. Пленки имеют неправильное считывание на стороне эмульсии (правильное считывание на стороне основы) для офсетной печати.

    WYSIWYG

    Аббревиатура для То, что вы видите, – это то, что вы получаете (произносится «wizzy-wig»): система или приложение, способное отображать страницы или изображения в соответствии с напечатанным результатом

    Напечатанный бегунок стола с логотипом

    Срок изготовления 4-5 рабочих дней.

    Настольный бегунок с напечатанным на заказ логотипом – лучший способ ПРИВЛЕКАТЬ трафик и произвести потрясающее ПЕРВОЕ ВПЕЧАТЛЕНИЕ на ваших живых мероприятиях или выставках. На живых мероприятиях ПЕРВЫЕ ВПЕЧАТЛЕНИЯ – это все! Тысячи клиентов доверили CustomBannerLab напечатать свой логотип на наших высококачественных скатертях из полиэфирной саржи. Ознакомьтесь со списком КЛЮЧЕВЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ ниже! Мы позаботимся о том, чтобы вы выглядели как миллион долларов на следующей выставке или мероприятии в прямом эфире. Просто заполните поля на этой странице, чтобы начать оформление заказа.Мы отправим вам БЕСПЛАТНОЕ E-PROOF на утверждение в течение 24 рабочих часов.

    Основные характеристики:

    • Быстрая доставка : Все скатерти отправляются в течение 4 рабочих дней!
    • БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Как только вы загрузите свой логотип, мы отправим вам БЕСПЛАТНУЮ ЦИФРОВУЮ ЭЛЕКТРОННУЮ ДОКАЗАТЕЛЬСТВО ПРЕЖДЕ, чем мы что-либо напечатаем!
    • БЕЗ ПЛАТЫ ЗА УСТАНОВКУ: Мы отказываемся от любых сборов за установку. Установка БЕСПЛАТНА!
    • БЕСПЛАТНАЯ полноцветная печать : Все цены включают печать вашего логотипа в ПОЛНОЦВЕТНОМ ЦВЕТЕ!
    • 2 размера направляющих стола: Мы предлагаем направляющие стола шириной 28 дюймов и шириной 57 дюймов – выбираете вы!
    • Полиэстер Twill: Стильный и элегантный, эту ткань среднего веса саржевого качества выставочного качества можно использовать снова и снова в течение многих лет.
    • Устойчивость к пятнам: Наши скатерти перед отгрузкой проходят обработку, устойчивую к появлению пятен, что помогает оттолкнуть следы от еды, напитков и даже следов от чернил.
    • Устойчивость к складкам: Наша полиэфирная саржа естественно устойчива к складкам. Будьте спокойны, зная, что ваша скатерть будет выглядеть безупречно и профессионально каждый раз, когда вы вынимаете ее из хранилища.
    • 100% Машинная стирка: В случае загрязнения наши скатерти можно стирать в домашней стиральной машине.Просто повесьте сушиться и погладить на низкой температуре.
    • Огнестойкость: Наши скатерти соответствуют требованиям огнестойкости для многих мероприятий, проводимых на крупных площадках.
    • НЕОГРАНИЧЕННОЕ количество вариантов цвета: Выберите один из более чем 20 стандартных цветов – ИЛИ – мы можем подобрать индивидуальный цвет, соответствующий цвету этой скатерти к цвету вашей компании / бренда.
    • NO FREY Edges: Все наши края и швы прошиты и обработаны кромкой, чтобы гарантировать НИКАКИХ полей профессиональной ткани FREY.
    • Гарантия 100% соответствия: У нас действует гарантия 100% соответствия сроком на 1 год. Если вы по какой-либо причине не удовлетворены своим товаром, мы вернем вам деньги или заменим его.

    У вас есть логотип? Вот ХУДОЖЕСТВЕННЫЕ СПЕЦИФИКАЦИИ:

    Да – ПОЛНЫЙ ЦВЕТНОЙ логотип включен в цену. Предоставьте нам один из следующих графических файлов:

    • ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНО – EPS 150 dpi со всем текстом, преобразованным в контуры.
    • 150 dpi JPG в реальном размере (дополнительно 25 долларов США)
    • Мы печатаем CMYK. Если вам нужно сопоставление цветов PMS, вы должны преобразовать все цвета PMS в CMYK перед загрузкой искусства, и этот файл ДОЛЖЕН БЫТЬ векторным файлом EPS.

    Когда вы разместите заказ, вы получите подтверждение по электронной почте. Это электронное письмо содержит ссылку для загрузки вашей завершенной работы. Как только произведение искусства будет получено, вам будет отправлено БЕСПЛАТНОЕ электронное подтверждение вашей скатерти в электронном виде для утверждения, прежде чем ваш заказ будет запущен в производство.Пожалуйста, позвоните нам по телефону 317-956-3898 с любыми дополнительными вопросами.

    ЗАГРУЗКА ИСКУССТВ:

    Если вы загружаете законченное произведение искусства, ССЫЛКА ДЛЯ ЗАГРУЗКИ будет включена в ваше электронное письмо с подтверждением заказа. По этой ссылке вы попадете в ФОРМУ ЗАГРУЗКИ. Если по какой-то причине эта форма несовместима с вашей системой, вы можете использовать БЕСПЛАТНУЮ утилиту отправки по адресу https://spaces.hightail.com/uplink/CustomBannerLab.

    Нужна ПОМОЩЬ В ДИЗАЙНЕ? Мы можем разработать для вас графику.

    Если у вас нет готового к печати графического файла, мы можем разработать для вас графику. Плата за графический дизайн этой услуги составляет 25 долларов США. В эту плату входит первоначальный дизайн с 2 редакциями. Если требуется более двух редакций, после этого будет взиматься плата в размере 15 долларов за каждую редакцию. Наши опытные графические дизайнеры создадут совершенно уникальную графику для вашего проекта. Он будет основан на информации, которую вы нам предоставляете. Вы должны выбрать опцию РАЗРАБОТАТЬ ДЛЯ МЕНЯ при размещении онлайн-заказа.Когда вы получите электронное письмо с подтверждением, там будет ссылка «НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, если вам нужен один из наших графических дизайнеров, чтобы спроектировать его для вас». Эта ссылка приведет вас к форме онлайн-информации, где мы будем собирать информацию о ваших дизайнерских идеях. Здесь вы можете загрузить логотипы / фотографии и поделиться своими дизайнерскими мыслями. Вскоре после того, как вы отправите эту форму, с вами свяжется графический дизайнер, который вместе с вами начнет процесс дизайна. После того, как вы заполните онлайн-форму и поговорите с нашим графическим дизайнером, вы получите свой первоначальный макет в течение 48 часов.Полный процесс от начала до конца обычно занимает 2-3 рабочих дня, поэтому обязательно укажите это время в своем расписании, когда вам понадобится заказ.

    Как заполнить и распечатать W2 на красных формах для SSA

    Программное обеспечение ezW2 одобрено SSA для печати всех форм W-2 (копии A, B, C, D, 1 и 2) и формы W-3 на белой бумаге. Если вы по-прежнему предпочитаете красные формы, программа ezW2 может заполнять данные и на предварительно распечатанных формах.

    Вот шаги:

    Шаг 1: Запустите программное обеспечение ezW2.



    Программное обеспечение
    ezW2: распечатайте и создайте электронный файл формы W2, W3, 1099-NEC и 1096 в доме.
    Неограниченное количество учетных записей компании! Неограниченное количество форм!

    Совместимость с Windows 10, 8.1, 8, 7, Vista и другими компьютерами с Windows.

    Попробуйте бесплатно прямо сегодня, бесплатно и без обязательств!

    Попробуйте ezW2 сейчас Купить сейчас


    Шаг 2: Вы можете щелкнуть верхнее меню Текущая компания, затем выбрать подменю Форма W2, чтобы открыть экран редактирования формы W-2.

    Если вы не заполнили формы w2, вы можете щелкнуть здесь, чтобы узнать, как добавить сотрудников и ввести данные формы W2.

    Шаг 3: Нажмите кнопку «Печать W2», чтобы открыть экран параметров печати W-2.


    Шаг 4: На экране параметров печати выберите «Только данные на предварительно отпечатанной лазерной форме с красными чернилами». Затем отметьте вариант ДВА W2 на форму.

    Убедитесь, что вы выбрали не менее ДВА сотрудников из списка сотрудников, если вы хотите сократить расходы, распечатав две разные формы W-2 на одном листе.

    Примечание

    1. Форма W-3 будет сгенерирована автоматически на основе информации формы W2

    2. ezW2 позволяет пользователю создавать неограниченное количество компаний с единой фиксированной ставкой. Поэтому, если у вас несколько компаний или вы бухгалтер, вы можете добавить новую компанию, щелкнув верхнее меню «Управление компанией-> Новая компания»

    3. Функция импорта данных файла .csv, функция печати PDF и функция электронного файла доступны с корпоративная версия и многопользовательская версия. Они недоступны в версии для малого бизнеса.Щелкните здесь, чтобы просмотреть список функций ezW2)


    Ссылки по теме

  • Как выполнить откат моих предыдущих данных ezW2 до новой версии?
  • Срок подачи форм W2 и 1099

    W2 W3

  • Как заполнить и распечатать форму W2
  • Как напечатать форму W2 W3 на белой бумаге
  • Как распечатать несколько копий на одной странице для сотрудника
  • Как распечатать данные W-2 на красных формах
  • Как конвертировать W2 в файлы формата PDF
  • Как сохранять в электронном виде W2 формы W3
  • Как распечатать форму W3

    1099-nec, 1096 (для последней версии ezW2)

  • Как заполнить и распечатать форму 1099-nec
  • Как заполнить формы 1099-nec в электронном виде
  • Как печатать формы 1099-nec на красных формах
  • Как преобразовать формы 1099-nec в файл PDF
  • Как распечатать форму 1096

    1099-misc, 1096 (для ezW2 2019 и более ранней версии)

  • Как заполнить и распечатать форму 1099-misc
  • Как заполнить формы 1099-misc в электронном виде
  • Как напечатать формы 1099-разное на красных формах
  • Как преобразовать 1099-разные формы в PDF-файл
  • Как распечатать форму 1096
  • W2C, W3c

    – Узнать больше о W2C и W3C

    Другие формы

    – Узнайте больше о программном обеспечении 1099s (1099A, 1099B, 1099C, 1099CAP, 1099DIV, 1099G, 1099H, 1099INT, 1099LTC, 1099MISC, 1099-nec, 1099OID, 1099PATR, 1099Q, 1099R, 1099S, 1099SA)

    – Узнайте больше о программном обеспечении 1098s (1098, 1098C, 1098E, 1098 T)

    – Подробнее о программном обеспечении 5498s (5498, 5498ESA, 5498SA)

    – Узнайте больше о программном обеспечении W2G, 1097BTC, 8935, 3921, 3922

    – Узнайте больше о том, как подавать формы ACA 1095 и 1094 в федеральные органы и штаты.

    Об AirPrint – служба поддержки Apple

    AirPrint – это технология Apple, которая помогает создавать высококачественные отпечатки без необходимости загрузки или установки драйверов.

    С помощью AirPrint можно легко печатать фотографии и документы в высоком качестве с Mac, iPhone, iPad или iPod touch без установки дополнительного программного обеспечения (драйверов). AirPrint встроен в самые популярные модели принтеров, например, перечисленные в этой статье.Функции AirPrint включают простое обнаружение, автоматический выбор носителя и параметры финишной обработки корпоративного класса.

    Следующие принтеры и серверы печати поддерживают AirPrint. Эта информация предоставляется каждым производителем и регулярно обновляется Apple. Если вы не видите свою модель в списке, обратитесь к производителю за дополнительной информацией.

    Узнайте, как печатать со своего Mac или с устройства iOS, и что делать, если вы не можете печатать.


    Серверы печати AirPrint

    Эти серверы печати поддерживают AirPrint.

    • HP ePrint Enterprise
    • HP JetAdvantage Connect
    • HP NFC / Wireless 1200w – аксессуар для мобильной печати
    • HP Roam для бизнеса
    • Устройство iPrint
    • Домашний сервер Lantronix xPrintServer
    • Lantronix xPrintServer Office
    • Lexmark International, Inc. Управление печатью
    • Мобильный соединитель LRS
    • Устройство Micro Focus iPrint
    • NT -ware uniFLOW
    • SEH Computertechnik GmbH primos


    USB-устройства

    Подобно принтерам AirPrint, эти USB-устройства позволяют печатать или сканировать без установки дополнительных драйверов.Поскольку для них требуется USB-соединение, они поддерживают печать или сканирование без драйверов только с компьютеров Mac.

    • Brother DS-940DW
    • Brother MDS-940DW
    • Canon E201
    • Canon E204
    • Canon G1220
    • Canon G2020
    • Canon G2260
    • Canon LiDE 300
    • Canon LiDE 400
    • Canon TS202
    • Canon TS203
    • Canon TS204
    • Canon TS205
    • Canon TS207
    • Canon TS208


    Adobe Systems Inc., Conexant Systems Inc. и Qualcomm Technologies Inc. являются поставщиками технологии AirPrint.

    Информация о продуктах, произведенных не Apple, или о независимых веб-сайтах, не контролируемых и не проверенных Apple, предоставляется без рекомендаций или одобрения. Apple не несет ответственности за выбор, работу или использование сторонних веб-сайтов или продуктов.Apple не делает никаких заявлений относительно точности или надежности сторонних веб-сайтов. Свяжитесь с продавцом для получения дополнительной информации.

    Дата публикации:

    Изогнутые формирователи изображений с адаптацией к форме на основе печатных оптоэлектронных пикселей с изображением киригами

  • 1.

    Song, Y. M. et al. Цифровые камеры с дизайном, вдохновленным глазом членистоногих. Nature 497 , 95–99 (2013).

    Артикул Google ученый

  • 2.

    Ko, H.C. et al. Электронный глазной фотоаппарат полусферической формы на основе сжимаемой кремниевой оптоэлектроники. Nature 454 , 748–753 (2008).

    Артикул Google ученый

  • 3.

    Kim, M. S. et al. Камера, вдохновленная водным зрением, на основе моноцентрической линзы и матрицы фотодиодов из кремниевых наностержней. Nat. Электрон. 3 , 546–553 (2020).

    Артикул Google ученый

  • 4.

    Floreano, D. et al. Миниатюрные изогнутые искусственные составные глаза. Proc. Natl Acad. Sci. США 110 , 9267–9272 (2013).

    Артикул Google ученый

  • 5.

    Gu, L. et al. Биомиметический глаз с сетчаткой из полусферических перовскитных нанопроволок. Природа 581 , 278–282 (2020).

    Артикул Google ученый

  • 6.

    Zhang, K. et al. Кремниевая оптоэлектроника Origami для полусферических электронных систем глаза. Nat. Commun. 8 , 1782 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 7.

    Wu, T. et al. Разработка и изготовление кремниевых мозаичных структур для моноцентрических формирователей изображений. Микросист. Nanoeng. 2 , 16019 (2016).

    Артикул Google ученый

  • 8.

    Guenter, B. et al. Датчики изображения с высокой степенью изгиба: практический подход для улучшения оптических характеристик. Опт. Экспресс 25 , 13010–13023 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 9.

    Фан, Д., Ли, Б., Кобурн, К. и Форрест, С. Р. От 2D к 3D: топологические преобразования оптоэлектронных схем без деформации и растяжения. Proc. Natl Acad. Sci. США 116 , 3968–3973 (2019).

    Артикул Google ученый

  • 10.

    Sim, K. et al. Трехмерная извилистая электроника, созданная с помощью конформной аддитивной печати. Nat. Электрон. 2 , 471–479 (2019).

    Артикул Google ученый

  • 11.

    Jung, I. et al. Система динамически настраиваемых полусферических электронных камер с регулируемым масштабированием. Proc. Natl Acad. Sci. США 108 , 1788–1793 (2011).

    Артикул Google ученый

  • 12.

    Lee, W. et al. Двумерные материалы в функциональной трехмерной архитектуре с приложениями в фотодетекции и визуализации. Nat. Commun. 9 , 1417 (2018).

    Артикул Google ученый

  • 13.

    Гуань, Ю.-С., Чжан, З., Тан, Ю., Инь, Дж. И Рен, С. Проведенные нанолисты из наноконфигурированного полимера, вдохновленные Киригами, с растяжимостью 2000%. Adv. Матер. 30 , 1706390 (2018).

    Артикул Google ученый

  • 14.

    Blees, M. K. et al.Графеновые киригами. Природа 524 , 204–207 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 15.

    Чой, Г. П. Т., Дудте, Л. Х. и Махадеван, Л. Программирование формы с использованием мозаики киригами. Nat. Матер. 18 , 999–1004 (2019).

    Артикул Google ученый

  • 16.

    Cho, Y. et al. Конструирование формы и структуры материалов фрактальным разрезом. Proc. Natl Acad. Sci. США 111 , 17390–17395 (2014).

    Артикул Google ученый

  • 17.

    Zhang, Y. et al. Механически управляемая форма киригами как путь к трехмерным мезоструктурам в микро / наномембранах. Proc. Natl Acad. Sci. США 112 , 11757–11764 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 18.

    Ван, К., Ван, К., Хуанг, З. и Сюй, С. Материалы и структуры для мягкой электроники. Adv. Матер. 30 , 1801368 (2018).

    Артикул Google ученый

  • 19.

    Kim, D.-H. и другие. Эпидермальная электроника. Наука 333 , 838 (2011).

    Артикул Google ученый

  • 20.

    Kim, D. H. et al. Материалы и конструкции некопланарных сеток для интегральных схем с линейной упругой реакцией на экстремальные механические деформации. Proc. Natl Acad. Sci. США 105 , 18675–18680 (2008).

    Артикул Google ученый

  • 21.

    Shin, G. et al. Микромеханика и усовершенствованные конструкции для изогнутых матриц фотоприемников в полусферических камерах с электронным глазом. Малый 6 , 851–856 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 22.

    Tang, Y. et al. Дизайн иерархически вырезанных петель для сильно растягиваемых и реконфигурируемых метаматериалов с повышенной прочностью. Adv. Матер. 27 , 7181–7190 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 23.

    Huang, Y. et al. Сборка и применение трехмерной конформной электроники на криволинейных поверхностях. Mater. Horiz. 6 , 642–683 (2019).

    Артикул Google ученый

  • 24.

    Xu, S. et al. Сборка микро / наноматериалов в сложные трехмерные конструкции путем изгиба при сжатии. Наука 347 , 154–159 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 25.

    Сан Ю., Чой В. М., Цзян, Х., Хуанг Ю. и Роджерс Дж. А. Управляемая потеря устойчивости полупроводниковых нанолент для растягиваемой электроники. Nat. Nanotechnol. 1 , 201–207 (2006).

    Артикул Google ученый

  • 26.

    Даффи, Д. К., Макдональд, Дж.К., Шуэллер, О. Дж. А. и Уайтсайдс, Г. М. Быстрое прототипирование микрофлюидных систем в поли (диметилсилоксане). Анал. Chem. 70 , 4974–4984 (1998).

    Артикул Google ученый

  • 27.

    Yu, C.J. et al. Адаптивные оптоэлектронные камуфляжные системы с дизайном, вдохновленным шкурой головоногих. Proc. Natl Acad. Sci. США 111 , 12998–13003 (2014).

    Артикул Google ученый

  • 28.

    Ву, Ю.-Л. и другие. Маломощный монолитно уложенный блок формирования изображения на органических фотодиодах с технологией включения напряжения. Adv. Электрон. Матер. 4 , 1800311 (2018).

    Артикул Google ученый

  • 29.

    Lee, W. et al. Формование тонких пленок перовскита с высоким разрешением для матрицы мультиплексированных датчиков изображения. Adv. Матер. 29 , 1702902 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 30.

    Ким, М. С., Ли, Г. Дж., Ким, Х. М. и Сонг, Ю. М. Параметрическая оптимизация боковых фототранзисторов НИПИН для гибких датчиков изображения. Датчики 17 , 1774 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 31.

    Rim, S.-B., Catrysse, P. B., Dinyari, R., Huang, K. & Peumans, P. Оптические преимущества решеток изогнутой фокальной плоскости. Опт. Экспресс 16 , 4965–4971 (2008).

    Артикул Google ученый

  • 32.

    Swain, P. & Mark, D. Изогнутые детекторные устройства и матрицы CCD для мультиспектральных астрофизических приложений и наземных стереофонических панорамных камер. Proc. SPIE https://doi.org/10.1117/12.554840 (2004).

  • 33.

    Юнг, И., Шин, Г., Малярчук, В., Ха, Дж. С. и Роджерс, Дж. А. Параболоидные электронные глазные камеры, использующие деформируемые матрицы фотодетекторов в гексагональной сетке. Заявл. Phys. Lett. 96 , 021110 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 34.

    Ли, Дж. Дж., Нам, В. И. и Сонг, Ю. М. Надежность искусственно созданной системы визуализации «рыбий глаз» с криволинейной поверхностью изображения. Опт. Laser Technol. 96 , 50–57 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 35.

    Диньяри, Р., Рим, С.-Б., Хуанг, К., Катрисс, П. Б. и Пьюманс, П. Изогнутый монолитный кремний для неплоских матриц фокальной плоскости. Заявл. Phys. Lett. 92 , 0

    (2008).

    Артикул Google ученый

  • 36.

    Huang, C.-C. и другие. Сложные глаза с большим полем зрения и широким спектром. Малый 10 , 3050–3057 (2014).

    Артикул Google ученый

  • 37.

    Ли, Дж. Дж., Чой, К., Ким, Д.-Х. & Сонг, Ю. М. Биоинспирированные искусственные глаза: оптические компоненты, цифровые камеры и визуальные протезы. Adv. Функц. Матер. 28 , 1705202 (2018).

    Артикул Google ученый

  • 38.

    Sim, K. et al. Полностью эластичная интегрированная электроника из высокоэффективных подвижных внутренне растягиваемых полупроводников. Sci. Adv. 5 , eaav5749 (2019).

    Артикул Google ученый

  • 39.

    Корец, Дж. Ф., Кук, К. А. и Кауфман, П.L. Старение хрусталика человека: изменение формы хрусталика при аккомодации и с потерей аккомодации. J. Opt. Soc. Являюсь. А 19 , 144–151 (2002).

    Артикул Google ученый

  • 40.

    Лопес-Хиль, Н. и Фернандес-Санчес, В. Изменение сферической аберрации во время аккомодации и ее влияние на реакцию аккомодации. J. Vis. 10 , 12 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 41.

    Фишер Р.Ф. Сила сокращения цилиарной мышцы человека во время аккомодации. J. Physiol. 270 , 51–74 (1977).

    Артикул Google ученый

  • 42.

    Li, L., Wang, Q.-H. & Цзян, W. Жидкостная линза с двойной перестраиваемой поверхностью для большой настройки мощности и улучшенных оптических характеристик. J. Opt. 13 , 115503 (2011).

    Артикул Google ученый

  • 43.

    Lukman, S. et al. Межслойные экситоны с высокой осцилляторной силой в двумерных гетероструктурах для фотодетектирования в среднем инфракрасном диапазоне. Nat. Nanotechnol. 15 , 675–682 (2020).

    Артикул Google ученый

  • 44.

    Xie, B. et al. Самофильтрующиеся узкополосные высокоэффективные органические фотодетекторы, позволяющие управлять локальной диссоциацией экситонов Френкеля. Nat. Commun. 11 , 2871 (2020).

    Артикул Google ученый

  • 45.

    Холлинз, М. Растягивается ли центральная сетчатка человека во время аккомодации? Nature 251 , 729–730 (1974).

    Артикул Google ученый

  • 46.

    Fan, S. et al. Изменения толщины сетчатки, вызванные аккомодацией, измеренные с помощью оптической когерентной томографии в спектральной области. J. Biomed. Опт. 19 , 1–8 (2014).

    Артикул Google ученый

  • 47.

    Lee, H. et al. Эндоскоп со встроенной прозрачной биоэлектроникой и тераностическими наночастицами для лечения рака толстой кишки. Nat. Commun. 6 , 10059 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 48.

    Choi, C. et al. Мягкое оптоэлектронное устройство, вдохновленное человеческим глазом, использующее изогнутую матрицу датчиков изображения высокой плотности MoS 2 – графен. Nat. Commun. 8 , 1664 (2017).

    Артикул Google ученый

  • 49.

    Лю, Х., Хуанг, Ю. и Цзян, Х. Искусственный глаз для скотопического зрения с биоинспирированным полностью оптическим усилителем светочувствительности. Proc. Natl Acad. Sci. США 113 , 3982–3985 (2016).

    Артикул Google ученый

  • Распечатать документ в Word

    Печать из Word в Интернете может показаться немного запутанной.Это потому, что сначала создается PDF-файл, чтобы сохранить макет и форматирование, а затем вы распечатываете PDF-файл.

    Примечание. Если вы используете Internet Explorer в Windows 7 или более ранней операционной системе, вам необходимо загрузить и установить бесплатное приложение Adobe Reader, прежде чем вы сможете распечатать документ.

    Распечатайте документ

    1. Щелкните Файл > Печать > Печать .

    2. Word для Интернета создает копию документа в формате PDF.

    3. Щелкните Щелкните здесь, чтобы просмотреть документ PDF , чтобы открыть предварительный просмотр документа в формате PDF.

      Совет: Если в качестве средства просмотра PDF по умолчанию используется Word, отмените Word для задания веб-печати, откройте документ в Word ( Редактировать документ> Редактировать в Word ) и распечатайте его из Word ( Файл> Печать ).

    4. Распечатайте документ:

      • В Windows 7 выберите принтер и измените или оставьте любые другие параметры, которые хотите, а затем щелкните Печать .

      • В Windows 8 в приложении Reader проведите вверх от нижней части экрана (или щелкните правой кнопкой мыши в любом месте) и выберите Печать .На странице «Печать» выберите принтер, выберите нужные параметры и нажмите Печать .

      • В Windows 10 в приложении Reader проведите вверх от нижней части экрана (или щелкните левой кнопкой мыши в любом месте) и выберите Печать . На странице «Печать» выберите принтер, выберите нужные параметры и нажмите Печать .

    Печать нескольких копий

    Если вам нужно несколько копий распечатки, измените количество копий на странице печати:

    • В Windows 7 или более ранних версиях вверху страницы печати находится поле с надписью Копии со стрелками вверх и вниз, чтобы вы могли выбрать, сколько копий документа вы хотите.Сделайте свой выбор (введя число или используя стрелки), а затем щелкните Печать .

    • В Windows 8 или Windows 10 выберите количество копий для печати (либо введя число, либо используя кнопки + и ), а затем нажмите Печать .

    Цветная печать

    Примечание: Если принтер, выбранный вами в разделе Принтер , поддерживает параметры цветной, черно-белой и полутоновой печати, параметры появятся в списке под заголовком Параметры .

    1. Щелкните Файл > Распечатать .

    2. В разделе Параметры выберите параметр цветной печати и любые другие параметры, которые вы хотите, и нажмите кнопку Печать .

    границ | Напечатанные на 3D-принтере каркасы из поли-капролактона, модифицированные биомиметическими внеклеточными матрицами для инженерии тканей предплюсневой пластины

    Введение

    Тарзальная пластинка – один из важнейших компонентов века.Он состоит из плотной соединительной ткани, богатых эластичных волокон и большого количества мейбомиевых желез. Пластинка предплюсны обеспечивает как структурную поддержку, так и физическую форму, что делает ее важным компонентом функции и внешнего вида века (Sun et al., 2015). Мейбомиева железа – это тип сальной железы с тубулоацинарной структурой и голокринной функцией. Он расположен в верхней и нижней пластинах предплюсны (Nichols et al., 2011). Мейбомиевые железы выделяют мейбом, соединение, состоящее из полярных (фосфолипиды) и неполярных (холестерин, восковые эфиры и сложные эфиры холестерина) липидов (Foulks and Bron, 2003).Затем эти липиды диффундируют в слезную пленку, образуя липидный слой слезной пленки, который стабилизирует слезную пленку и предотвращает испарение слезы (Hwang et al., 2017).

    Распространенными причинами дефектов век являются, главным образом, инвазия опухолью предплюсневой пластинки или травма глазницы, приводящая к дефектам частичной или полной толщины век (Zhou et al., 2010). Тканевая инженерия тарзальной пластинки жизненно важна для реконструкции века, но в настоящее время она остается ограниченной из-за сложности ткани тарзальной пластинки и отсутствия подходящих заменителей.Идеальный заменитель пластинки предплюсны должен иметь характеристики, аналогичные толщине, поверхностным характеристикам, прочности и гибкости естественной ткани предплюсны. Более того, он должен быть совместим с тканями, и его легко получить и использовать (Chen et al., 2005). Обычно используемые заменители для восстановления дефектов пластинки предплюсны включают в себя в основном твердую слизистую пластинки (Mannor et al., 1994; Goldberg et al., 1999), носовой хрящ и гетерогенную склеру (Tenzel et al., 1975). Однако у этих тканей есть свои ограничения, такие как большая усадка послеоперационных трансплантатов, ограниченный диапазон тканей и иммунное отторжение.Самый большой дефект – это невозможность заменить секреторную функцию мейбомиевых желез в пластинке предплюсны. Поэтому изготовление заменителя пластинки предплюсны, который выполняет определенную функцию секреции липидов, имеет важное значение.

    Трехмерная (3D) печать – это метод создания 3D-объектов индивидуального характера с использованием компьютерного дизайна (Song et al., 2018). Он сыграл революционную роль в производстве каркасов тканевой инженерии, потому что он преодолевает существующие ограничения и создает наиболее подходящие каркасы за счет простых и эффективных размеров пористости, которые не могут быть достигнуты с использованием традиционных методов строительных лесов (Kao et al., 2015; Ю. и др., 2016). Полезные особенности технологии аддитивного производства могут быть дополнительно реализованы в биопечати и биологических каркасах биологических объектов со сложной архитектурой (Bae et al., 2018; Hiller et al., 2018). Благодаря этим преимуществам технологию 3D-печати можно очень хорошо использовать для печати тонких и сложных тканей, таких как печать на роговице (Isaacson et al., 2018; Sorkio et al., 2018).

    В этом исследовании технология 3D-печати была впервые применена для изготовления каркасов из пластин предплюсны с помощью PCL.Стволовые клетки, полученные из жировой ткани человека (hADSC), высевали на каркасы PCL, а затем децеллюляризовали, чтобы получить каркасы DMA-PCL, чтобы улучшить биологическое поведение. Себоциты SZ95 высевали на каркас для секреции липидов. Это исследование было направлено на оценку потенциальной ценности себоцитов SZ95, засеянных на каркасы DMA – PCL, в будущей тканевой инженерии тарзальной пластинки. Степень цитосовместимости, клеточной адгезии, пролиферации и адипогенеза каркасов была подтверждена in vitro, , с использованием себоцитов SZ95 человека, и in vivo, , с использованием голых мышей.Схема, показывающая процессы, использованные в этом исследовании, представлена ​​на рисунке 1.

    Рисунок 1 . Принципиальная схема этого исследования. Принципиальная схема изготовления 3D-печатных каркасов DMA – PCL и посева себоцитов SZ95 на каркасы для тканевой инженерии тарзальной пластинки.

    Материалы и методы

    Изготовление каркасов PCL

    3D-каркасы были изготовлены на 3D-принтере (HTS-1200, Fochif Tech, Китай). Гранулы PCL (Mw: 40–45 кДа, поставляются Wuxi Shaxinnaxin Material, Китай) помещали в картридж для печати и предварительно нагревали.Затем пасту нагревали до 70 ° C и наносили наслоение с помощью сопла (диаметр 0,31 мкм) со скоростью печати 2 мм / с. Были оценены различные размеры пор (200, 300 и 400 мкм) PCL, и был выбран оптимальный размер пор.

    Характеристика каркасов PCL

    Морфологию каркасов PCL наблюдали с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM; JSM-6701; JEOL, Tokyo, Japan). Образцы были напылены золотом в течение 50 с для увеличения проводимости перед визуализацией с использованием SEM.

    Механические свойства каркасов PCL определяли на одноосной машине для испытания материалов (CMT4202, Китай).Образцы прямоугольной формы (20 × 10 мм) сжимали с постоянной скоростью 0,5 мм / мин. Для каждого образца максимальный наклон в линейной области кривой напряжения-деформации при сжатии, соответствующей деформации 0–20%, использовался для расчета модуля сжатия. Было протестировано не менее трех образцов.

    Выделение и культура hADSC

    hADSC были выделены из подкожной жировой ткани век молодых амбулаторных пациентов (в основном женщин в возрасте 20–25 лет), поступивших на блефаропластику.Это исследование было одобрено Наблюдательным советом Шанхайской девятой народной больницы при Медицинской школе Шанхайского университета Цзяо Тонг. Вкратце, собранные жировые ткани измельчали ​​на мелкие кусочки и расщепляли 0,2% коллагеназой A в течение 10 часов при встряхивании при 37 ° C. Затем клетки центрифугировали при 1200 об / мин в течение 10 минут и осажденные клетки культивировали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) / F12 (Invitrogen, США), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и 100 Ед / мл пенициллин / стрептомицин. (Gibco, США) при 37 ° C в присутствии 5% CO 2 .Среду меняли каждые 2 дня.

    Каркасы DMA – PCL

    hADSC культивировали в среде DMEM / F12, содержащей 10% FBS и 50 мкмоль / л витамина C (Sigma – Aldrich, США), как обсуждалось в предыдущем исследовании (Ji et al., 2018). Перед посевом клеток каркасы PCL помещали в 24-луночный планшет. 5 × 10 4 hADSC (пассаж 3-5) суспендировали в 50 мкл культуральной среды, и суспензию клеток наносили по каплям поверх каркасов. Засеянные клетками каркасы затем инкубировали при 37 ° C в течение получаса, чтобы обеспечить адгезию клеток в пористую структуру, перед добавлением среды для размножения (500 мкл / каркас).Среду меняли каждые 2 дня в течение 2 недель. Через 2 недели наносили буфер для разделения клеток. Буфер для разделения клеток состоял из 0,5% гидроксида аммония Тритон + 20 ммоль / л NH 4 OH и растворялся в фосфатно-солевом буфере (PBS). Буфер для разделения клеток постепенно добавляли в планшет, оставляли на 5 мин и затем трижды промывали PBS. Затем добавляли 100 ед / мл ДНКазы (Sigma – Aldrich, США). Каркасы выдерживали при 37 ° C в течение 1 ч, трижды промывали PBS, сушили и хранили (в темноте) при 4 ° C.

    Угол контакта каркасов PCL и DMA-PCL

    Краевые углы смачивания водой каркасов PCL и DMA-PCL определяли методом твердой капли. Измерения проводились с использованием гониометра Data Physics (модель OCA 15 Plus) System, оснащенного электронным шприцем, видеокамерой и программным обеспечением SCA 20. Сначала каркасы помещали на пластину гониометра и центрировали кончиком иглы. После этого с помощью программного обеспечения через иглу над каркасом была выпущена капля 4 мкл сверхчистой воды.За процессом наблюдали с помощью камеры, которая зафиксировала точный момент, когда капли дождя достигли поверхности каркаса. Эту процедуру повторяли трижды, чтобы получить средний угол смачивания левой и правой частей капли.

    Иммунофлуоресценция коллагена I и фибронектина на каркасах PCL и DMA-PCL

    ADSC как с децеллюляризацией, так и без нее на каркасе фиксировали 4% параформальдегидом, и образцы инкубировали со следующими антителами в течение ночи при 4 ° C: антифибронектин (1: 500, BD Biosciences) и антиколлаген I (1: 200, Санта-Крус).После иммунофлуоресценции каркасы инкубировали с разведением 1: 400 вторичных антител, меченных флуоресценцией, разведенных в PBS (Alexa Fluor 488-козлиное антитело против кролика / мыши и Alexa Fluor 546-козье антитело против кролика / мыши, BD Biosciences) и защищали. от света в течение 1 ч при комнатной температуре. Для получения изображений использовался конфокальный лазерный сканирующий микроскоп (CLSM) (A1, Nikon, Япония).

    Культура себоцитов SZ95 и морфология клеток на трехмерных каркасах

    Всего 1 × 10 5 себоцитов SZ95 (Zouboulis et al., 1999) были засеяны на каркасы PCL или каркасы DMA-PCL в DMEM (Gibco, Калифорния, США) с добавлением 10% FBS (Gibco), 5 нг / мл рекомбинантного эпидермального фактора роста человека (Peprotech, США) и 100 Ед / мл пенициллин / стрептомицин (Gibco, США) в увлажненной атмосфере, содержащей 5% CO 2 при 37 ° C. Подробный метод культивирования клеток был таким же, как упоминалось ранее для hADSC. Среду меняли через день. Через семь дней после посева клеток скаффолды фиксировали 0,25% глутаровым альдегидом (Merck, Германия) при 4 ° C в течение ночи.Образцы трижды промывали PBS, а затем обезвоживали этанолом с изменяемой концентрацией (30, 50, 70, 80, 90 и 100% об. / Об. ) в течение 10 минут каждый. Впоследствии образцы были высушены до критической точки, после чего они были покрыты золотом и исследованы с помощью SEM.

    Анализ живой / мертвой жизнеспособности

    Окрашивание жизнеспособности

    выполняли с использованием теста Live / Dead (Thermo Fisher Scientific, Калифорния, США), как описано в предыдущем исследовании (Chen et al., 2015). Вкратце, 5 × 10 4 себоцитов SZ95 культивировали в течение 7 дней в культуральной среде на каркасах или в 24-луночных планшетах (контрольная группа).После того, как культуральный раствор был отсосан и промыт PBS, клетки инкубировали в PBS, содержащем гомодимер этидия 2 (EthD-2) и кальцеин-ацетоксиметиловый эфир (CAM), при 37 ° C в течение 15 минут и трижды промыли PBS. Живые клетки окрашивали зеленым флуоресцентным САМ, а мертвые клетки окрашивали красным флуоресцентным EthD-2. Флуоресцентный микроскоп (Olympus BX51; Olympus, Токио, Япония) использовали для получения изображений окрашивания клеток.

    Количественная оценка жизнеспособности клеток

    Для обнаружения влияния 3D-печатных каркасов с DMA или без него на пролиферацию клеток использовали набор для анализа клеток CCK-8 (Dojindo, Япония).Вкратце, себоциты SZ95 высевали на каркасы с плотностью 2 × 10 4 клеток / лунку в 24-луночных планшетах. Через 0, 1, 3, 5 и 7 дней посева клеток клетки инкубировали с 10% CCK-8 в среде. После инкубации в течение 4 ч оптическую плотность каждой лунки измеряли при 450 нм с помощью считывающего устройства для микропланшетов (ELx800, Bio-Tek, США).

    Иммунофлуоресценция F-актина и оценка продукции липидов на каркасах

    себоцитов SZ95 высевали на каркасы с плотностью 5 × 10 4 клеток / лунку в 24-луночных планшетах.После 7 дней культивирования себоциты SZ95 фиксировали 4% параформальдегидом (Sigma – Aldrich), растворяли в PBS в течение 15 минут и промывали PBS при комнатной температуре. Образцы погружали в фаллоидин, конъюгированный с Alexa Fluor 505 (разведение 1: 1000 в PBS, Invitrogen) для получения цитоскелета F-актина на 1 час при комнатной температуре. Затем каркасы трижды промывали PBS. Для окрашивания капель нейтрального липида клетки инкубировали в растворе HCS LipidTox (разведение 1: 1000 в PBS, Invitrogen) в течение 30 мин при комнатной температуре.CLSM использовали для получения изображений окрашивания клеток.

    Выделение РНК, обратная транскрипция и количественная полимеразная цепная реакция

    Себоциты SZ95 высевали на каркасы с плотностью 5 × 10 4 клеток / лунку в 24-луночных планшетах. После 7 дней культивирования нагруженные клетками каркасы извлекали из чашки для культивирования с помощью пинцета для микроскопа и погружали в реагент TRIzol (Thermo Fisher Scientific, США). Тотальную РНК экстрагировали с использованием реагента TRIzol в соответствии с протоколами производителя.Концентрацию РНК измеряли с использованием спектрофотометра и программного обеспечения NanoDrop 2000, и соотношение OD260 / 280 РНК считалось чистым от 1,9 до 2,1. Впоследствии 1000 нг РНК подвергали обратной транскрипции с использованием набора реагентов PrimeScript RT (TaKaRa, Япония). Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в реальном времени проводили с использованием системы обнаружения ПЦР в реальном времени 7500 (Applied Biosystems). После 40 циклов амплификации относительную мРНК анализировали с использованием метода Pfaffl (Pfaffl, 2001).Эффективность реакции ПЦР измеряли с праймерами с использованием серийных разведений кДНК (1: 1, 1: 5, 1:25, 1: 125, 1: 625 и 1: 3125). Последовательности праймеров, используемые для ПЦР в реальном времени, перечислены в таблице 1.

    Таблица 1 . Праймеры, используемые для количественной полимеразной цепной реакции.

    In vivo Имплантация

    Шесть голых мышей были предоставлены Шанхайским экспериментальным центром на животных. Все процедуры на животных выполнялись в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Медицинской школы Шанхайского университета Цзяо Тонг и одобрены Комитетом по этике животных Шанхайской Девятой народной больницы, входящей в состав Медицинской школы Шанхайского университета Цзяо Тонг.1 × 10 6 себоцитов высевали на 3D-каркасы и культивировали в течение 7 дней in vitro . Затем засеянные клетками каркасы имплантировали голым мышам подкожно. После имплантации в течение 1 месяца голых мышей умерщвляли и собирали образцы для дальнейших экспериментов. Каждый эксперимент был протестирован в трех экземплярах. Имплантаты помещали в компаунд с оптимальной температурой резания (Sakura Seiki, Токио, Япония), а затем разрезали на секции толщиной 8 мм. Себоциты человека SZ95 окрашивали антителом к ​​ядерному антигену человека (Novus Biological, США, 235-1) для оценки статуса пролиферации in vivo .Для окрашивания Oil Red O замороженные срезы каркаса DMA-PCL фиксировали в 4% параформальдегиде в течение 15 минут, промывали в PBS в течение 5 минут и окрашивали в течение 10 минут в свежеприготовленном растворе Oil Red O. После отмывки PBS в течение 15 мин срезы контрастировали гематоксилином и помещали в 90% глицерин.

    Статистический анализ

    Компьютерная система Sigma Gel System (SPSS Inc., Иллинойс, США) и программа Image J были использованы для анализа интегральной оптической плотности (IOD) иммунофлуоресцентных изображений.Односторонний дисперсионный анализ с последующим тестом Стьюдента t использовали для определения статистической значимости (значение P- ) полученных данных. Все данные, представленные в этом исследовании, были представлены как среднее ± SEM трех параллельных исследований. Статистически значимым считалось значение P <0,05 ( * P <0,05 и *** P <0,001).

    Результаты

    Характеристики 3D-печатных лесов

    Параметры этого каркаса были основаны на исследовании Dr.Мишель (Sun et al., 2015), которая исследовала 10 здоровых тканей предплюсневой пластинки. 3D-каркасы размером 20 × 10 × 2 мм с пятью центральными каналами (диаметром 1 мм) внутри каркаса (рис. 2А).

    Рисунок 2 . Каркас PCL, напечатанный на 3D-принтере, и его подробные параметры. (A) Были представлены длина, ширина и толщина (20 × 10 × 2 мм) 3D-печатных каркасов с пятью центральными каналами (диаметром 1 мм) внутри каркаса. (B) Были напечатаны и показаны различные размеры пор печати (200, 300 и 400 мкм).Центральные каналы были правильно сформированы, когда размер пор для печати был установлен на 200 или 300 мкм. Напротив, когда размер пор увеличился до 400 мкм, центральные каналы не были хорошо сформированы из-за обрушения некоторых областей. (C) Были продемонстрированы типичные кривые напряжения-деформации сжатия для различных размеров пор 3D-печатных каркасов PCL. Модуль сжатия уменьшился, когда размер пор увеличился с 200 до 400 мкм. (D) SEM-изображения показали вид сверху и вид сбоку 3D-печатных каркасов с размером пор 200 мкм. (E) Угол контакта воды с каркасами из PCL и DMA-PCL. Фотография капли в тот момент, когда она достигла поверхности образца. Средний краевой угол смачивания воды на каркасе PCL составлял 93,3 ± 7,5 °, в то время как капля воды немедленно абсорбировалась каркасами DMA-PCL.

    Размер пор для печати составлял 200, 300 и 400 мкм (рис. 2В). Когда размер пор печатного каркаса был установлен на 400 мкм, центральные каналы не имели правильной формы, поскольку расстояние между центральными каналами было слишком большим.Когда размер пор для печати был установлен на 200 или 300 мкм, форма центрального канала была правильной. Однако, учитывая, что чем меньше размер пор, тем больше площадь клетки для прикрепления клеток, тем больше клетки пролиферируют в протоке. Прочность на сжатие была измерена для подтверждения работоспособности каркасов в тканевой инженерии. Были показаны типичные кривые напряжение-деформация сжатия для различных размеров пор 3D-печатных каркасов PCL (рис. 2C). Модуль сжатия немного уменьшился, когда размер пор увеличился с 200 до 400 мкм.Согласно предыдущему исследованию, средний начальный модуль Юнга тарзальной пластинки человека составлял 0,14 МПа (Sun et al., 2015). Печатные каркасы (200 мкм) имели средний модуль сжатия 0,23 МПа, который не особо отличался от такового у человеческой предплюсневой пластины. Таким образом, учитывая структуру и прочность каркасов, 200 мкм было выбрано в качестве оптимального параметра печати в этом исследовании.

    На рис. 2D показано СЭМ-изображение каркасов с размером пор 200 мкм.Диаметр проволоки и размер пор оказались одинаковыми, а центральный канал также был хорошо сформирован.

    Смачиваемость материала является важным параметром, влияющим на прикрепление, пролиферацию, миграцию и жизнеспособность клеток (Yao et al., 2017). Краевой угол смачивания водой измеряли для определения смачиваемости каркасов. Результаты показали, что средний угол контакта с водой каркаса PCL составлял 93,3 ± 7,5 °, что приводило к гидрофобным поверхностям (рис. 2E). Капля воды в каркасах DMA-PCL немедленно абсорбировалась каркасами, что указывает на их гидрофильность.Однако, поскольку капли воды проникли на поверхность слишком быстро, чтобы камера могла сделать снимок, результат был представлен как дополнительное видео 1.

    Оценка DMA и морфологии себоцитов SZ95 на каркасах DMA – PCL

    Частичный состав DMA был выявлен с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания коллагена I и фибронектина. Как показано на Фигуре 3A, оба матричных белка коллагена I и фибронектин были иммуноокрашены с высокой интенсивностью флуоресценции, что указывает на то, что поверхность каркаса была покрыта достаточным количеством DMA.Идеальные материальные основы для тканевой инженерии должны поддерживать нормальную морфологию и пролиферацию клеток. Клетки с морфологией, напоминающей булыжник, прилипали к каркасам и распределялись по ним через 7 дней после того, как себоциты SZ95 были засеяны на каркасы DMA – PCL (Рисунок 3B). По сравнению с каркасом PCL клетки на каркасе DMA-PCL показали более плотные связи между клетками и более полную морфологию клеток.

    Рисунок 3 . Оценка DMA и морфологии себоцитов SZ95 на каркасах PCL и DMA – PCL. (A) Типичные изображения иммунофлуоресцентного окрашивания коллагена I и фибронектина. Оба матричных белка иммуноокрашивали с высокой интенсивностью флуоресценции на каркасах DMA-PCL (масштабная линейка: 200 мкм). Иммунофлуоресценцию использовали для обнаружения экспрессии коллагена I (зеленый) и фибронектина (красный) после посева hADSC на каркас до и после децеллюляризованного матрикса. После децеллюляризованного матрикса ядро ​​(4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндол, DAPI, Blue) исчезло, а коллаген I и фибронектин образовали однородную сетчатую структуру волокон на поверхности каркаса. (B) SEM-изображения показали морфологию себоцитов SZ95 через 7 дней после посева на каркасы PCL и DMA-PCL. По сравнению с каркасом PCL, клетки на каркасе DMA-PCL показали более плотные межклеточные связи, и морфология клеток была более полной.

    Жизнеспособность и пролиферация клеток

    Набор для анализа «живой / мертвый» использовали для оценки биосовместимости каркаса. Биосовместимость каркаса была значительно увеличена путем покрытия его DMA, как показано на рисунке 4A.На рисунке 4В показана статистика, относящаяся к результатам «живые / мертвые»: доля мертвых клеток на каркасах PCL была значительно выше, чем на чашке для культивирования или чашке для культивирования, покрытой DMA, в то время как доля мертвых клеток DMA-PCL значительно снизилась. Результаты анализа CCK-8 показаны на фиг. 4C. Было замечено, что с 3-го дня значение OD 450 в группе DMA было значительно выше, чем в группе CTR, что доказало, что DMA может способствовать пролиферации себоцитов. Между тем, значение OD 450 в группе PCL было значительно ниже, чем в других трех группах на 5 и 7 дни, демонстрируя, что простые каркасы PCL не способствовали пролиферации клеток.По сравнению с группой PCL значение OD 450 в группе DMA-PCL значительно увеличилось, подтверждая, что слой DMA на каркасе PCL также способствует пролиферации себоцитов.

    Рисунок 4 . Жизнеспособность и пролиферация клеток на каркасах DMA-PCL. (A) Жизнеспособные клетки на каркасах DMA – PCL оценивали с помощью анализа окрашивания «живые / мертвые». Живые клетки окрашивались в зеленый цвет, а мертвые клетки окрашивались в красный цвет (шкала: 100 мкм). (B) Статистические результаты анализа окрашивания живых / мертвых показали, что доля мертвых клеток на каркасах PCL была значительно выше, чем на чашке для культивирования, в то время как доля мертвых клеток DMA-PCL значительно снизилась. (C) Пролиферацию себоцитов SZ95 на каркасах DMA-PCL через 0, 1, 3, 5 и 7 дней после посева клеток определяли с использованием анализа CCK-8. DMA, нанесенный на каркасы PCL, может значительно усилить пролиферацию себоцитов по сравнению с группой PCL. Значения выражены как среднее ± стандартное отклонение. * P <0,05 и *** P <0,001. CTR, блюдо с культурой; DMA, культуральная чашка, покрытая DMA; PCL, поликапролактоновый каркас; DMA-PCL, каркас из поликапролактона, покрытый DMA.

    Синтез липидов на каркасах PCL и DMA – PCL

    себоцитов SZ95 культивировали на каркасах PCL и DMA – PCL в течение 7 дней, а затем окрашивали F-актином и LipidTox. F-актин отражал количество клеток на каркасе. Следовательно, относительная ИОД липидов / F-актина может частично отражать способность клеток секретировать липиды. На Фигуре 5A показана иммунофлуоресценция F-актина и липида на каркасе PCL и DMA-PCL, а на Фигуре 5B показаны статистические результаты синтеза липидов.На рисунке 5C показана трехмерная реконструкция липидов на каркасах PCL. Себоциты SZ95, посеянные на каркасы DMA-PCL, секретировали больше липидов, чем те, что были высеяны на каркасы PCL ( P <0,001), что указывает на то, что DMA может способствовать дифференцировке себоцитов SZ95 и вносить вклад в функцию адипогенеза.

    Рисунок 5 . Сравнение образования липидных капель на каркасах PCL и DMA-PCL. (A) Типичные изображения иммунофлуоресцентного окрашивания F-актина и нейтрального липида после посева клеток в течение 7 дней in vitro на каркасы PCL и DMA-PCL (масштабная линейка: 500 мкм).Значительно большее количество липидов секретировалось себоцитами на каркасах DMA-PCL по сравнению с таковыми на каркасах PCL. (B) Количественный анализ относительного значения IOD липидов / F-актина. (C) Объемное трехмерное изображение F-актина и липидов через 7 дней после посева клеток. Количество липидов, секретируемых себоцитами на каркасах DMA-PCL, было очевидно выше, чем на каркасах PCL (шкала: 100 мкм). *** P <0,001.

    Экспрессия гена

    Анализ экспрессии генов, связанных с метаболизмом липидов in vitro, (фиг. 6A) четко показал, что себоциты SZ95, культивируемые на каркасах DMA-PCL, проявляли значительно более высокую экспрессию генов SREBP-1, FADS-2 и FAS через 7 дней по сравнению с клетками, культивированными на Каркасы PCL и лунки для культивирования.SREBP-1, FADS-2, PPARγ и FAS, экспрессируемые на трехмерных каркасах, по меньшей мере в два раза превышали экспрессию в лунках для культивирования. Кроме того, DMA-PCL имеет более высокие уровни экспрессии генов для SREBP-1, FADS-2 и FAS по сравнению с PCL, что указывает на то, что, возможно, DMA играет решающую роль в процессе метаболизма липидов себоцитов. Между тем, были исследованы уровни экспрессии генов, связанных с пролиферацией, адгезией, апоптозом и воспалением (фиг. 6B). Уровень экспрессии Ki67 на 3D-каркасах был по крайней мере в три раза выше, чем в лунках для культивирования.Хотя уровни экспрессии IL-6 и каспазы-3 в клетках на каркасах PCL были выше по сравнению с клетками, которые культивировали в лунках для культивирования, уровни экспрессии этих двух генов значительно снизились после того, как DMA был нанесен на каркасы. Эти результаты дополнительно продемонстрировали, что DMA играет важную роль в стимулировании пролиферации клеток и проявляет противовоспалительный эффект на уровне РНК.

    Рисунок 6 . Экспрессия генов клеток после посева на каркасы PCL и DMA – PCL в течение 7 дней. (A) Были протестированы уровни экспрессии четырех генов метаболизма липидов (SREBP-1, PPARγ, FADS-2 и FAS). Уровни экспрессии SREBP-1, FADS-2 и FAS были значительно выше в клетках на каркасах DMA-PCL, что указывает на то, что каркасы с 3D-печатью лучше способствуют синтезу липидов. (B) Уровни экспрессии ZO-1 (соединительный ген), Ki67 (ген пролиферации), каспазы-3 (ген, связанный с апоптозом) и IL-6 (цитокин воспаления). Уровни экспрессии ZO-1 и Ki67 были значительно выше в клетках на каркасах DMA-PCL по сравнению с таковыми в клетках на CTR, что указывает на то, что DMA-PCL усиливает адгезию и пролиферацию себоцитов.Между тем уровни экспрессии каспазы-3 и IL-6 были значительно ниже на каркасе DMA-PCL по сравнению с каркасом PCL, что указывает на то, что DMA, нанесенный на PCL, подавлял апоптоз и воспаление. SREBP-1, белок-1, связывающий регулирующий элемент стерол; PPARγ, рецептор-γ, активируемый пролифератором пероксисом; FADS-2, десатураза жирных кислот-2; FAS, синтаза жирных кислот; ZO-1, Zona Occludens-1; ИЛ-6, Интерлейкин-6. * P <0,05, ** P <0,01 и *** P <0.001.

    In vivo Состояние себоцитов SZ95

    Состояние in vivo себоцитов SZ95 наблюдали с помощью иммуногистохимии через 1 месяц после встраивания каркасов под кожу голых мышей. Себоциты хорошо пролиферировали in vivo через 1 месяц и сформировали ацинарную структуру мейбомиевых желез с интактным эпителиальным слоем (фигура 7A). В то же время каркас с себоцитами окрашивали Oil Red O. Было обнаружено, что каркас имеет дикое распределение липидов, что доказывает, что себоциты все еще секретируют обильные липиды in vivo (фигура 7B).

    Рисунок 7 . In vivo Статус себоцитов SZ95. Себоциты SZ95 высевали на каркасы DMA-PCL, и комплекс клетка-каркас имплантировали голым мышам подкожно. (A) Иммуногистохимическое окрашивание изображений антител к ядерному антигену человека. Себоциты на каркасах все еще хорошо пролиферировали in vivo через 1 месяц. Можно наблюдать ацинарную структуру мейбомиевых желез, повторяющую форму каркаса, вместе с интактным эпителиальным слоем. (B) Изображение окрашивания Oil Red O. Количество липидов секретировалось себоцитами внутри каркасов in vivo (шкала: 200 мкм).

    Обсуждение

    Тканевая инженерия тарзальной пластинки была труднодостижимой из-за сложной структуры и функции секреции липидов тарзальной пластинки. В этом исследовании технология 3D-печати была впервые использована для изготовления каркасов из пластин предплюсны. Между тем, поверхность каркаса была покрыта DMA, чего можно было просто достичь путем посева аутологичных ADSC.Свежеприготовленные каркасы DMA – PCL показали хорошую биосовместимость и улучшенные характеристики пролиферации, дифференцировки и противовоспалительного действия клеток. Себоциты, засеянные на каркасы DMA-PCL, секретировали обильные липиды in vitro и хорошо пролиферировали in vivo .

    На сегодняшний день было проведено несколько исследований в области инженерии тарзальных пластин. В 2010 году доктор Цзин Чжоу использовал поли (3-гидроксибутират- со -3-гидроксигексаноат) для изготовления каркасов и применил их к дефектам тарзальной пластинки века крысы.Морфология век была исправлена ​​через 2 месяца после имплантации (Zhou et al., 2010). В 2018 году Дай и др. создали конструкцию поли (лактид- co -гликолид) / фибриновый гель / стволовые клетки костного мозга / (липофектамин / пДНК-трансформирующий фактор роста-β1) и применили ее к модели дефекта тарзальной пластинки века кролика. Через 8 недель была сформирована новая тарзальная пластинка века (Dai et al., 2019). В этих исследованиях была успешно восстановлена ​​форма век, но функция секреции липидов мейбомиевыми железами не могла быть восстановлена.

    Таким образом, это исследование было проведено для имитации структуры пластинки предплюсны, одновременно сосредоточивая внимание на функции секреции липидов.

    Среди синтетических полимеров PCL привлек большое внимание благодаря своей биосовместимости, низкой температуре плавления (59–64 ° C), хорошей растворимости и простоте использования (Bahcecioglu et al., 2019). Он широко применялся в системах 3D-печати с использованием селективного лазерного спекания и FDM. Его широкое распространение можно частично объяснить тем, что он был одобрен регулирующими органами как синтетический полимер для восстановления тканей и как средство доставки лекарств Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (Jing et al., 2018). В результате каркас, напечатанный с помощью PCL, было легче применять в клинике. В этом исследовании PCL использовался для изготовления каркаса из пластин предплюсны с использованием техники FDM. По сравнению с традиционными процессами, такими как выщелачивание частиц / солей (Esposito et al., 2013) и электроспиннинг (Baker and, 2007), FDM представляла собой метод быстрого прототипирования, позволяющий создавать трехмерные каркасы с полным контролем геометрических параметров, таких как как размер пор, пористость и размер межсоединений пор (Lantada and Morgado, 2012).Как упоминалось ранее, форма дефекта века, вызванного резекцией опухоли или травмой, во многих случаях была неправильной. Технология 3D-печати может точно напечатать бионическую пластину предплюсны в соответствии с формой дефекта века. Между тем, согласно клиническому опыту, регенерация пластинки предплюсны трудна и требует больше времени. PCL разлагается значительно медленнее по сравнению с другими алифатическими полиэфирами in vivo (Kweon et al., 2003), и каркас может поддерживать первоначальную механическую поддержку до тех пор, пока не произойдет адекватное врастание ткани (Zhang et al., 2017). Следовательно, относительно медленная деградация PCL может обеспечить механическую поддержку в течение достаточного времени.

    Конечно, PCL также имеет некоторые недостатки, такие как плохая гидрофильность и плохая адгезия клеток (Sun et al., 2006). Следовательно, большинство тканевых конструкций на основе PCL не могут имитировать биохимические характеристики нативных тканей. Внеклеточный матрикс (ЕСМ) может обеспечивать клетки сложной клеточной средой и поддерживать идеальную структуру для клеток как на тканевом, так и на уровне органов (Wu et al., 2019). Как сообщалось, децеллюляризованный ЕСМ оказывает дискретное влияние на сборку матрикса, пролиферацию, миграцию, передачу сигналов и клеточные обратные связи по сравнению с плоскими поверхностями, покрытыми белками (Satyam et al., 2020). Таким образом, технология децеллюляризованного матрикса была использована для улучшения биосовместимости PCL. Например, Guilak et al. Показали, что децеллюляризованный ECM из биологических тканей может значительно улучшить заживление ран даже на моделях крыс с диабетом, склонных к хроническому воспалению (Guilak et al., 2009). Ji et al. обнаружили, что DMA усиливает пролиферацию клеток-предшественников сетчатки и дифференцировку нейронов (Ji et al., 2018). В этом исследовании для децеллюляризации использовались аутологичные ADSC. С одной стороны, жировая ткань была обильной и поверхностной, и ее можно было собирать, не причиняя большого вреда организму по сравнению с другими тканями. С другой стороны, некоторые относительные исследования функции прямого доступа к памяти уже проводились в лаборатории. Таким образом, можно было легко получить каркасы DMA-PCL, и было исследовано влияние DMA на адгезию и пролиферацию себоцитов SZ95.Данные наглядно продемонстрировали, что DMA усиливает адгезию и пролиферацию клеток, вероятно, из-за повышенной гидрофильности каркасов PCL (Pattison et al., 2005; Stevens and George, 2005). Компоненты DMA, такие как коллаген и фибронектин, также играют важную роль в стимулировании пролиферации клеток и снижении воспалительного ответа (Kang et al., 2012). Себоциты также секретируют больше липидов на каркасах DMA-PCL, способствуя непрерывной секреции липидов на поверхность глаза и помогая формировать липидный слой слезной пленки после трансплантации.В исследовании in vivo себоциты SZ95, посеянные на каркасы DMA-PCL, все еще хорошо пролиферировали через 1 месяц под кожей голых мышей. Это предполагает, что каркасы, засеянные себоцитами SZ95, могут быть многообещающим биоматериалом для регенерации дефектов пластинки предплюсны.

    себоцитов SZ95 были выбраны в качестве многообещающих посевных клеток в этом исследовании для восстановления функции секретирования липидов. Мейбомиева железа представляет собой тип сальной железы, расположенной на верхней и нижней пластинах предплюсны, с трубчатой ​​структурой и полной секреторной функцией.Мейбоциты или себоциты выделяют липиды на поверхность глаза или кожи, а липидный слой действует как барьер (Chhadva et al., 2017). Пластинка предплюсны имеет плохую регенеративную способность из-за отсутствия вокруг нее сосудистых тканей. Следовательно, источник мейбоцитов ограничен. При отсутствии мейбомиевых желез у многих пациентов с дефектами век развивается синдром сухого глаза. Напротив, себоциты широко распространены по всему телу, секретируя липиды, триглицериды и свободные жирные кислоты для защиты кожи.Поскольку себоциты обладают функцией секреции липидов и богаты аутологичными источниками, они могут служить важными семенными клетками для замены мейбоцитов в будущем.

    Это исследование также имело некоторые ограничения. Во-первых, эшафоты были спроектированы и напечатаны в масштабе человеческой предплюсневой пластины. Толщина каркаса была относительно большой, что затрудняло восстановление дефекта in situ у животных, таких как кролики или крысы. Во-вторых, себоциты высевали на каркасы после завершения печати; однако точное распределение ячеек гарантировать нельзя.Технология 3D-биопечати может быть применена для одновременной печати себоцитов и материалов в будущем для точного распределения себоцитов в ацинарном положении и формирования функционирующего ацинуса.

    Выводы

    Это исследование было новым в использовании технологии 3D-печати для печати каркасов из PCL, имитирующих человеческую пластину предплюсны. Впоследствии DMA был покрыт каркасом посредством культивирования клеток и децеллюляризации hADSC. Нанесение ДМА на каркасы сделало поверхность более гидрофильной.Каркасы DMA-PCL значительно усиливали адгезию и пролиферацию себоцитов. Более того, себоциты могут хорошо дифференцироваться на каркасе и выполнять функцию секретирования липидов. По сравнению с каркасами без DMA каркасы с DMA-PCL значительно подавляли экспрессию воспалительного гена и гена апоптоза. В то же время себоциты вылезли из каркасов и через 1 месяц образовали ацинарную структуру мейбомиевых желез и эпителиальный слой in vivo . Основываясь на этих результатах, считалось, что каркасы, напечатанные на 3D-принтере, в сочетании с технологией децеллюляризации могут в значительной степени применяться в тканевой инженерии.Напечатанные на 3D-принтере каркасы DMA-PCL вместе с себоцитами являются многообещающими заменителями в тканевой инженерии тарзальной пластинки.

    Заявление о доступности данных

    Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

    Заявление об этике

    Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике животных Шанхайской девятой народной больницы, входящей в медицинскую школу Шанхайского университета Цзяо Тонг.

    Авторские взносы

    LC, HS и YF разработали исследование и эксперименты.LC и DY проводили эксперименты. NW и WZ внесли свой вклад в анализ данных. QY участвовал в разработке экспериментов и редактировании финальной статьи. CY, HS и YF отредактировали рукопись. CZ создал клеточную линию сальных желез человека SZ95. Все авторы обсудили результаты, рассмотрели рукопись и одобрили окончательную версию рукописи.

    Финансирование

    Это исследование было поддержано Национальным фондом естественных наук Китая (гранты № 81570812, 81770888), Шанхайской муниципальной комиссией по образованию: Грантовая поддержка клинической медицины Gaofeng (грант №20161421), Шанхайская муниципальная комиссия по науке и технологиям: проект коммерциализации и индустриализации результатов исследований (грант № 17411963800) и Комиссия по науке и технологиям Шанхая (грант № 17DZ2260100).

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Дополнительные материалы

    Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https: // www.frontiersin.org/articles/10.3389/fbioe.2020.00219/full#supplementary-material

    Дополнительное видео 1. Угол контакта каркасов DMA-PCL.

    Список литературы

    Bae, S. W., Lee, K.-W., Park, J. H., Lee, J., Jung, C. R., Yu, J., et al. (2018). Трехмерная биопечать искусственная трахея с эпителиальными клетками и хондрогенно дифференцированными мезенхимальными стволовыми клетками костного мозга. Внутр. J. Mol. Sci. 19: 1624. DOI: 10.3390 / ijms1

    24

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Бахчеджоглу, Г., Хасирчи, Н., Билген, Б., Хасирчи, В. (2019). 3D-печатная конструкция из PCL / гидрогеля с зонально-специфическим биохимическим составом, имитирующим состав мениска. Биотехнология 11: 025002. DOI: 10.1088 / 1758-5090 / aaf707

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Бейкер Б. М. и Маук Р. Л. (2007). Влияние выравнивания нановолокон на созревание инженерных конструкций мениска. Биоматериалы 28, 1967–1977. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2007.01.004

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Chen, J., Yan, C., Zhu, M., Yao, Q., Shao, C., Lu, W., et al. (2015). Электропряденая нановолоконная мембрана SF / P (LLA-CL): потенциальный субстрат для эндотелиальной кератопластики. Внутр. J. Nanomedicine 10, 3337–3350. DOI: 10.2147 / IJN.S77706

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Chen, J. Q., Gu, J.-J., Peng, H.J., Huang, T., Chen, L.S., and Zhou, S.-Y.(2005). [Реконструкция века in situ с использованием бесклеточного дермального матрикса аллотрансплантата]. Чжунхуа Ян Кэ За Чжи 41, 409–413. DOI: 10.3760 / J: issn: 0412-4081.2005.05.007

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чхадва П., Голдхардт Р. и Галор А. (2017). Болезнь мейбомиевых желез: роль дисфункции желез при болезни сухого глаза. Офтальмология 124, S20 – S26. DOI: 10.1016 / j.ophtha.2017.05.031

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дай, Ю., Джин, К., Фэн, X., Е, Дж., И Гао, К. (2019). Регенерация различных типов тканей зависит от взаимодействия нагруженных стволовыми клетками конструкций и микроокружения in vivo . Mater. Sci. Англ. C Mater. Биол. Прил. 94, 938–948. DOI: 10.1016 / j.msec.2018.10.035

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Эспозито, А. Р., Мода, М., де Мело Каттани, С. М., де Сантана, Г. М., Барбьери Дж. А., Мунхоз М. М. и др. (2013). Каркас PLDLA / PCL-T для тканевой инженерии мениска. Biores. Открытый доступ 2, 138–147. DOI: 10.1089 / biores.2012.0293

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Фолкс, Г. Н., и Брон, А. Дж. (2003). Дисфункция мейбомиевых желез: клиническая схема для описания, диагностики, классификации и классификации. Ocul. Серфинг. 1, 107–126. DOI: 10.1016 / S1542-0124 (12) 70139-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Голдберг, Р. А., Джоши, А. Р., Макканн, Дж.Д. и Шорр Н. (1999). Лечение тяжелого рубцового энтропиона с использованием общих трансплантатов слизистой оболочки. Arch. Офтальмол. 117, 1255–1259. DOI: 10.1001 / archopht.117.9.1255

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гилак Ф., Коэн Д. М., Эстес Б. Т., Гимбл Дж. М., Лидтке В., Чен С. С. и др. (2009). Контроль судьбы стволовых клеток путем физического взаимодействия с внеклеточным матриксом. Стволовые клетки клетки 5, 17–26. DOI: 10.1016 / j.stem.2009.06.016

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хиллер Т., Берг Дж., Эломаа Л., Рорс В., Уллах И., Шаар К. и др. (2018). Создание трехмерной модели печени, содержащей внеклеточный матрикс человека в биочерке на основе альгината / желатина, путем экструзионного биопечати для исследований инфекций и трансдукции. Внутр. J. Mol. Sci. 19: 3129. DOI: 10.3390 / ijms129

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хван, Х.С., Парфитт, Дж. Дж., Браун, Д. Дж., И Джестер, Дж. В. (2017). Дифференциация и обновление мейбоцитов: понимание новых механизмов дисфункции мейбомиевых желез (MGD). Exp. Eye Res. 163, 37–45. DOI: 10.1016 / j.exer.2017.02.008

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ji, J., Zhang, D., Wei, W., Shen, B., Zhang, Y., Wang, Y., et al. (2018). Децеллюляризованный матрикс мезенхимальных стромальных клеток, полученных из жировой ткани, усиливал пролиферацию клеток-предшественников сетчатки через путь Akt / Erk и дифференцировку нейронов. Цитотерапия 20, 74–86. DOI: 10.1016 / j.jcyt.2017.08.019

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Jing, L., Wang, X., Liu, H., Lu, Y., Bian, J., Sun, J., et al. (2018). Зеин увеличивает цитоаффинность и способность к биоразложению каркасов, напечатанных на 3D-принтере композитными красками на основе зеина и поли (эпсилон-капролактон). ACS Appl. Матер. Интерфейсы 10, 18551–18559. DOI: 10.1021 / acsami.8b04344

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Канг Ю., Ким, С., Бишоп, Дж., Хадемхоссейни, А., Янг, Ю. (2012). Остеогенная дифференцировка МСК костного мозга человека на ECM, происходящих из HUVEC, и бета-TCP каркасе. Биоматериалы 33, 6998–7007. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2012.06.061

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Као, К. Т., Лин, К. С., Чен, Ю. В., Йе, С.-Х., Фанг, Х. Ю., Ши, М. Ю., и др. (2015). Поли (дофаминовое) покрытие 3D-печатных каркасов из поли (молочной кислоты) для инженерии костной ткани. Mater. Sci. Англ. C Mater. Биол. Прил. 56, 165–173. DOI: 10.1016 / j.msec.2015.06.028

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Квеон, Х., Ю, М.К., Пак, И.К., Ким, Т.Х., Ли, Х.С., Ли, Х.-С. и др. (2003). Новые разлагаемые поликапролактоновые сети для тканевой инженерии. Биоматериалы 24, 801–808. DOI: 10.1016 / S0142-9612 (02) 00370-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лантада, А.Д., и Моргадо, П. Л. (2012). Быстрое прототипирование для биомедицинской инженерии: текущие возможности и проблемы. Annu. Преподобный Биомед. Англ. 14, 73–96. DOI: 10.1146 / annurev-bioeng-071811-150112

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Маннор, Г. Э., Мазерс, В. Д., Вулфли, Д. Э. и Мартинес, Дж. А. (1994). Трансплантат слизистой твердого неба при синдроме Стивенса-Джонсона. Am. J. Ophthalmol. 118, 786–791. DOI: 10.1016 / S0002-9394 (14) 72559-0

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Николс, К.К., Фоулкс, Г. Н., Брон, А. Дж., Глазго, Б. Дж., Догру, М., Цубота, К. и др. (2011). Международный семинар по дисфункции мейбомиевых желез: резюме. Инвест. Офтальмол. Vis. Sci. 52, 1922–1929. DOI: 10.1167 / iovs.10-6997a

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Паттисон, М. А., Вурстер, С., Вебстер, Т. Дж., И Хаберстро, К. М. (2005). Трехмерные наноструктурированные каркасы из PLGA для замены тканей мочевого пузыря. Биоматериалы 26, 2491–2500. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2004.07.011

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сатьям, А., Цокос, М. Г., Тресбак, Дж. С., Зейголис, Д. И., и Цокос, Г. К. (2020). Биомиметический субстрат клеточного происхождения, богатый внеклеточным матриксом, поддерживает пролиферацию, дифференциацию и поддержание нативного фенотипа подоцитов. Adv. Функц. Материал . DOI: 10.1002 / adfm.2012. [Epub перед печатью].

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Песня, К., Ван, З., Лю, Р., Чен, Г., и Лю, Л. (2018). Трехмерная (3-D) микросреда внеклеточного матрикса на основе микротехнологий для рака и других заболеваний. Внутр. J. Mol. Sci. 19: 935. DOI: 10.3390 / ijms1

    35

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Соркио А., Кох Л., Койвусало Л., Дейвик А., Миеттинен С., Чичков Б. и др. (2018). Структуры, имитирующие ткань роговицы на основе стволовых клеток человека, с использованием лазерной 3D-биопечати и функциональных биочувствительных элементов. Биоматериалы 171, 57–71. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2018.04.034

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сунь, Х., Мэй, Л., Сонг, К., Цуй, X., и Ван, П. (2006). in vivo деградация, абсорбция и выведение имплантата на основе PCL. Биоматериалы 27, 1735–1740. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2005.09.019

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сан, М. Т., Фам, Д. Т., О’Коннор, А.J., Wood, J., Casson, R., Selva, D., et al. (2015). Биомеханика ткани предплюсны век. J. Biomech. 48, 3455–3459. DOI: 10.1016 / j.jbiomech.2015.05.037

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Тензел Р. Р., Миллер Г. Р. и Рубензик Р. (1975). Рубцовый энтропион верхнего века, обработанный склеральным трансплантатом. Arch. Офтальмол. 93, 999–1000. DOI: 10.1001 / archopht.1975.01010020783008

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ву, Ю.A., Chiu, Y.C., Lin, Y.H., Ho, C.C., Shie, M.Y., Chen, Y.W. и др. (2019). Напечатанные на 3D-принтере биоактивные биоскатники из силиката кальция / поли-эпсилон-капролактона, модифицированные биомиметическими внеклеточными матрицами для регенерации костей. Внутр. J. Mol. Sci. 20: 942. DOI: 10.3390 / ijms20040942

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Yao, Q., Zhang, W., Hu, Y., Chen, J., Shao, C., Fan, X., et al. (2017). Электропряденые коллагеновые / поли (L-молочная кислота-сопсилон-капролактон) каркасы для тканевой инженерии конъюнктивы. Exp. Ther. Med. 14, 4141–4147. DOI: 10.3892 / etm.2017.5073

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Yu, Y., Moncal, K. K., Li, J., Peng, W., Rivero, I., Martin J. A., et al. (2016). Трехмерная биопечать с использованием самосборных масштабируемых «тканевых нитей» без каркаса в качестве новой биочернилы. Sci. Отчет 6: 28714. DOI: 10.1038 / srep28714

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжан, З. З., Wang, S.-J., Zhang, J.-Y., Jiang, W.-B., Huang, A.-B., Qi, Y.-S., et al. (2017). Напечатанный на 3D-принтере каркас из поли (эпсилон-капролактон), дополненный мезенхимальными стволовыми клетками для полного замещения мениска: 12- и 24-недельное исследование на животных на модели кролика. Am. J. Sports Med. 45, 1497–1511. DOI: 10.1177 / 03635465176

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhou, J., Peng, S.-W., Wang, Y.-Y., Zheng, S.-B., Wang, Y., Chen, G.-Q., et al. (2010).Использование каркасов из поли (3-гидроксибутират-со-3-гидроксигексаноата) для восстановления предплюсны при реконструкции век у крыс. Биоматериалы 31, 7512–7518. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2010.06.044

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Зубулис, К. К., Зельтманн, Х., Нейтцель, Х. и Орфанос, К. Э. (1999). Создание и характеристика бессмертной клеточной линии сальных желез человека (SZ95). J Invest Dermatol. 113, 1011–1020.DOI: 10.1046 / j.1523-1747.1999.00771.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.